Summary
A new in vitro assay for screening the sensitivity of human tumour cells against Cyclophosphamide has been developed. While biologically activated Cyclophosphamide was unsuitable because of unpurities in the material, synthetic 4-Hydroxycyclophosphamide was shown to inhibit the incorporation of tritiated uridine and thymidine into the nucleic acids of human tumour cells in vitro.
29 tumours including 14 mammarial carcinomas, 8 ovarial carcinomas and 7 other malignant tumours were tested. While 12 tumours showed a significant and 5 only a slight inhibition of the 3H-uridine incorporation in vitro. 12 tumours showed no effect.
Histologically none-differentiated tumours were more sensitive against 4-Hydroxycyclo-phosphamide as compared with the more differentiated ones.
First observations point to 4-Hydroperoxycyclophosphamide instead of 4-Hydroxy-cyclophosphamide as a more suitable form of activated Cyclophosphamid for the in vitro assay of Cyclophosphamide sensitiveness because of the higher stability and better availability of this compound.
Zusammenfassung
Das Cytostaticum Cyclophosphamid (ENDOXAN®) wird in vivo über 4-Hydroxycyclophosphamid zur Wirkform „gegiftet“ bzw. aktiviert.
Unsere Ergebnisse zeigen, daß auf biologischem Weg aktiviertes Cyclophosphamid für in vitro Tumorsensibilitätsteste ungeeignet ist, da die Versuchsergebnisse durch die zwangsläufig mit zugesetzten Fremdeiweiße bzw. Leberextrakte verfälscht werden. Diese Schwierigkeiten lassen sich mit chemisch dargestelltem 4-Hydroxycyclophosphamid umgehen. Bei 29 Tumortestungen (14 Mammacarcinome, 8 Ovarialcarcinome, 7 weitere Malignome) wurde mit Hilfe einer Kurzzeitinkubationstechnik die Einbauhemmung von 3H-Uridin und 3H-Thymidin geprüft. 12 Tumoren zeigten deutliche, 5 weitere mäßige Beeinträchtigungen des Einbaus der Nucleinsäurepräkursoren. 11 von 12 in vitro gegen 4-Hydroxycyclophosphamid empfindliche Tumoren reagierten auch gegenüber anderen Cytostatica sensibel. Histologisch entdifferenzierte Tumoren waren empfindlicher gegenüber 4-Hydroxycyclophosphamid als hochdifferenzierte Tumoren. Erste weiterführende Untersuchungen deuten darauf hin, daß das nur geringe Zeit haltbare 4-Hydroxycyclophosphamid in vitro ersetzbar ist durch 4-Hydroperoxycyclophosphamid. Diese Substanz ist bei −20° C mehrere Monate haltbar.
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Wir danken Frau M. Bamberg für die gewissenhafte Assistenz bei der Durchführung der Tumortestungen.
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Bastert, G., Schmidt-Matthiesen, H., Voelcker, G. et al. In vitro Sensibilitätstestung von Tumoren gegenüber aktiviertem Cyclophosphamid (4-Hydroxycyclophosphamid). Kurzzeitinkubation von Originaltumorzellen und 3H-Uridinbzw. 3H-Thymidineinbau. Z. Krebsforsch. 84, 37–47 (1975). https://doi.org/10.1007/BF00305687
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