Abstract
In the logarithmic phase of growth,Candida japonica produced into media containing soluble starch, maltose or glucose, an amylase hydrolysing starch to glucose, oligosaccharides of the maltose series and dextrins which coloured red with iodine. The presence of calcium carbonate in the medium promoted growth of the culture, but markedly lowered the amylolytic activity of the culture fluid. Paper electrophoretic separation, ionex chromatography on DEAE cellulose and study of substrate specificity and the relationship of activity to the temperature and pH of the medium showed only one enzyme in the crude enzyme preparation. This was a dextrinogenic amylase of the α-amylase type, with greater capacity for breaking down lower homologues of substances of the amylose series, including maltose, than other known α-amylases. The optimum temperature was 55°C, with 20 minutes’ incubation, and the optimal pH was between 5 and 6. The reaction rate of hydrolytic reactions rose with the length of the chain of the substrate. Isomaltotetraose was hydrolysed about 20 times more slowly than maltotetraose. No formation of isomaltose or panose transglucosidation products was found.
Abstract
В фазе логарифмического роста в среде с растворимым крахмалом, мальтозой и глюкозой Candida japonica образовала амилазу, которая вызывала гидролиз крахмала в глюкозу, далее, олигосахариды ряда мальтозы и декстрины, окрашивавшиеся йодом в красный цвет. Наличие в среде углекислого кальция способствовало росту культуры, но вызывало значительное понижение амилолитической активности культивационной жидкости. В сыром энзиматическом препарате был с помощью различных методов (электрофоретическое разделение на бумаге, хроматография на целлюлозе DEAE, изучение специфичности субстратов и зависимости активности от температуры и pH среды) обнаружен только один фермент. Это была декстриногенная амилаза типа α-амилазы с повышенной по сравнению с остальными известными α-амилазами спосбностью расщеплять более низкие гомологи веществ ряда амилозы. Температурный оптимум активности при 20-минутной инкубации был 55°C, оптимальная для активности величина pH—между 5,0 и 6,0. Скорость гидролитической реакции увеличивалась с удлинением цепочки субстрата. Изомальтотетраоза гидролировалась приблизительно в 20 раз медленнее, чем мальтотетраоза. Образование продуктов трансглюкозидации изомальтозы или паннозы не было отмечено.
This is a preview of subscription content, log in via an institution to check access.
Similar content being viewed by others
References
Bourne, E. J. Haworth, N., Hacey, A., Peat, S.:The amylolytic degradations of starch. A revision of the hypothesis of sensitization. J. chem. Soc. (London) 924, 1948.
Castellani, A.: J. Trop. Med. Hyg. 40: 293, 1937. Cit. by Lodder, J., Kreger van Rij, N. J. W.:The Yeasts, 1952.
Difco Manual, 9th Ed., Difco Labs. Inc., Detroit 1, Michigan 1953.
Ebertová, H.:Mimobuněčné amylolytické systemy kvasinek, především Endomycopsis capsularis a Candida japonica. Thesis, Praha 1962.
Green, S. R., Stone, I.:Fermentability of wort trisaccharide. Wallerstein Lab. Comms. 15: 347, 1952.
Hais, I., Macek, K.:Papírová chromatografie. Nakl. Čs. akad. věd, Praha 1959.
Hanč, O.:Chemická laboratorní příručka. Průmyslové vydavatelství, Praha 1951.
Keil, B., Šormová, Z.:Laboratorní technika biochemie. Nakl. Čs. akad. věd, Praha 1959.
Lodder, J., Kreger van Rij, N. J. W.:The Yeasts. North Holland Publ. Co., Amsterdam 1952.
Meyer, K. H., Bernfeld, D., Boissonas, R. A., Gürtler, P., Noelting, G.:Starch solutions and pastes and their molecular interpretation. J. physical colloid Chem. 53: 319, 1949.
Pazur, J. H.:The hydrolysis of amylotriose and amylotetraose by salivary amylase. J. biol. Chem. 205: 75, 1953.
Pazur, J. H., Ando, T.:The action of an amyloglucosidase of Aspergillus niger on starches and maltooligosaccharides. J. biol. Chem. 234: 1966, 1959.
Saito, K., Ota, M.: J. Brewery Sci. (Japan) 12: 159, 1934. Cited by Lodder, J., Kreger van Rij, N. J. W.:The Yeasts, 1952.
Sawai, T.:An amylase of Candida tropicalis var. japonica. I. Maltase and transglucosylase activities of the amylase. J Biochem. (Japan) 45: 49, 1958.
Sawai, T.:An amylase of Candida tropicalis var. japonica. II. Further evidences for broad specificity of the amylase. J. Biochem. (Japan) 48: 382, 1960.
Sawai, T., Hehre, E. J.:A novel amylase (Candida transglucosyl-amylase) that catalyzes glucosyl transfer from starch and dextrins. J. biol. Chem. 237: 2047. 1962.
Schoch, T. J.:The fractionation of starch. Adv. in Carbohydrate Chem. 1: 247, 1945.
Skinner, C. E., Fletcher, D. W.:A review of the genus Candida. Bact. Rev. 24: 397, 1960.
Somogyi, M.:A new reagent for the determination of sugars. J. biol. Chem. 160: 61, 1945.
Sumner, J. B., Myrbäck, K.:The Enzymes Vol. 1, Acad. Press Inc., New York 1950.
Whelan, W. J., Bailey, J. M., Roberts, P. J. P.:The mechanism of carbohydrate action. I. The preparation and properties of maltodextrin substrates. J. chem. Soc. (London) 1293, 1953.
Wilson, E. J., Schoch, T. J., Hudson, C. S.:The action of macerans amylase on the fractions of starch. J. Amer. chem. Soc. 65: 1380, 1943.
Author information
Authors and Affiliations
Rights and permissions
About this article
Cite this article
Ebertová, H. Study of the formation and properties of the amylolytic system ofCandida japonica . Folia Microbiol 8, 333–341 (1963). https://doi.org/10.1007/BF02906030
Received:
Issue Date:
DOI: https://doi.org/10.1007/BF02906030