Antigenic characterisation of virus isolates from vaccinated dogs dying of rabies

Summary

Four rabies virus isolates from dogs that succumbed to rabies infection in Nigeria within one year of anti-rabies vaccination were characterised by monoclonal antibodies (MAbs). The samples were screened for rabies and rabies-related viral antigens by the indirect fluorescent antibody test, performed with MAb 502-2, which recognises the nucleocapsid (NC) protein of all known Lyssaviruses and with MAb 422-5 which identifies African rabiesrelated viruses. All four canine virus isolates displayed positive fluorescence with MAb 502-2 and were negative with MAb 422-5. In the anti-NC MAb characterisation with a panel of 34 additional MAbs, all isolates displayed positive staining with 32 of the MAbs, were negative with MAb 102-27 and all displayed poor immunofluorescence with MAb 377-7. On the basis of reactivity with a panel of 40 anti-glycoprotein (G) MAbs the isolates were separated into four distinct viral subtypes. None of these canine isolates was identified as the common attenuated Flury LEP rabies strain used for domestic animal vaccination and none resembled other previously characterised rabies viruses from Nigeria.

Résumé

Les auteurs ont caractérisé au moyen des anticorps monoclonaux (AMC) quatre isolats de virus rabique(s) provenant de chiens ayant succombé à la rage au Nigeria moins d'un an après avoir été vaccinés. Les prélèvements ont été soumis au dépistage des antigènes viraux rabiques et apparentés à la rage par le test de la fuorescence indirecte, réalisé avec l'anticorps monoclonal 502-1, qui reconnait la protéine de la nucleocapside de tous les Lyssavirus connus et avec l'anticorps monoclonal 422-5 qui identifie les virus apparentés de la rage africaine. Les quatre isolats de virus canins ont tous révélé une fluorescence positive avec l'anticorps monoclonal 502-12 et négative avec le 422-5. Lors de la caractérisation de l'anticorps monoclonal de la nucléocapside avec un éventail de 34 anticorps monoclonaux supplémentaires, tous les isolats ont révélé une coloration positive avec 32 des anticorps monoclonaux. Par contre, les tests ont été négatifs avec l'AMC 102-27 et pauvres avec I'AMC 377-7 dans tous les cas. Sur la base de leur relation avec un éventail de 40 anticorps monoclonaux anti-glycoprotéiniques (G), les isolats ont été séparés en quatre sous-types viraux distincts. Aucun de ces isolats canins n'a été identifié comme provenant de la souche rabique commune atténuée LEP Flury utilisée pour la vaccination des animaux domestiques, aucun ne ressemblant aux autres virus rabiques précédemment caractérisés et provenant du Nigéria.

Resumen

Se caracterizaron cuatro aislamientos virales de perros que murieron de rabia, a pesar de haber sido vacunados un año antes en Nigeria; la caracterización se llevó a cabo mediante la técnica de anticuerpos monoclonales (Acs M). Se utilizó la técnica indirecta de anticuerpos fluorescentes, para detectar el virus de la rabia y antígenos relacionados. La prueba se llevó a cabo con Acs M 502-1, los cuales reconocen la proteína de los nucleocápsidos de todos los Lyssavirus conocidos y con Acs M 422-5 los cuales identifican todos los virus africanos relacionados con el de rabia. Todos los cuatro aislamientos desplegaron fluorescencia positiva con. Acs M 502-12 y fueron negativos con Acs M 422-5. En la caracterización anti nucleocápsidos con AcsM, con un panel de 34 AcsM adicionales, todos los aislamientos desplegaron tinción positiva con 32 de los AcsM, fueron negativos con AcsM 102-27 y todos desplegaron inmunofluorescencia pobre con AcsM 377-7. Los aislamientos fueron separados dentro de cuatro subtipos virales distintos, con base en la reactividad con un panel de 40 anti-glicoproteinas (G) AcsM. Ninguno de estos aislamientos caninos fue identificado como perteneciente a la cepa atenuada Flurry LEP, utilizada para la vacunación de animales domésticos y ninguno fue similar a cepas virales rábicas aisladas previamente en Nigeria.