Summary
14 insulinomas were examined immunohistologically using the peroxidase labelled antibody method. 8 tumours were investigated immediately after extirpation. 7 of these reacted with insulin and porcine-C-peptide antisera but not with glucagon antiserum. Only a B-cell carcinoma with an unusually low insulin concentration was negative. One year after embedding in paraffin the immunohistologic reaction with insulin antiserum had markedly decreased in the tumours; however, not in the islet of the adjacent pancreas. From 6 patients 1 to 4 years old paraffin-embedded material of the tumour and the normal pancreas was available. In this group 4 tumours with an elevated insulin concentration reacted immunohistologically only weakly with an insulin antiserum and two tumours (one with high and one with low insulin concentration were immunohistologically negative, while the islets of the adjacent panceas of all six cases showed a strong reaction. Thus the immunohistilogic reaction of insulin in B-cell tumours but not in normal islets depends on the time elapsed between the paraffin embedding and the examination. Only tumours fixed in Bouin's fluid but not in Karnovsky's solution gave a positive immunohistologie reaction, while the islets of the adjacent pancreas reacted positively also after fixation in Karnovsky's solution. These findings suggest differences between the normal and the tumour insulin. A correlation between aldehyde-thionin stain and immunohistology indicates the superiority of immunohistology in identifying insulin producing tumour cells.
Résumé
14 insulinomes ont été soumis à un examen immunohistologique à l'aide de la méthode de l'anticorps marqué à la peroxydase. 8 tumeurs ont été étudiées immédiatement après leur extirpation. 7 d'entre elles réagissaient avec les sérums anti-insuline et anti-porcine-C-peptide, mais non avec le sérum anti-glucagon. Un seul carcinome à cellules B avec un contenu en insuline inhabituellement bas, a été négatif. Un an après l'inclusion dans la paraffine, la réaction immunohistologique avec le sérum anti-insuline avait nettement diminué dans les tumeurs, mais non dans les îlots du pancréas adjacent. Chez 6 patients, on disposait de fragments de la tumeur et du pancréas normal inclus dans la paraffine depuis 1 à 4 ans. Dans ce groupe, 4 tumeurs avec un contenu élevé en insuline, n'avaient qu'une faible réaction immunohistologique avec un sérum antiinsuline, et deux tumeurs (l'une avec un contenu élevé en insuline, l'autre avec un contenu faible) ont eu une réaction immunohistologique négative, tandis que les îlots du pancréas adjacent réagissaient fortement dans les six cas. Donc, la réaction immunohistologique de l'insuline dans les tumeurs à cellules B, mais non dans les îlots normaux, dépend du temps écoulé entre l'inclusion dans la paraffine et le moment où elles sont examinées. Seules les tumeurs fixées dans du liquide de Bouin, mais non dans la solution de Karnovsky, ont eu une réaction immunohistologique positive, tandis que les îlots du pancréas adjacent réagissaient positivement après fixation dans la solution de Karnovsky. Ces résultats suggèrent qu'il existe des différences entre l'insuline du pancréas normal et l'insuline des tumeurs. Une comparaison entre la coloration à l'aldéhyde-thionine et l'immunohistologie indique la supériorité de l'immunohistologie dans l'identification des cellules tumorales produisant de l'insuline.
Zusammenfassung
14 insulinproduzierende Tumoren wurden mittels Peroxydase-markierter Antikörper immunhistologisch untersucht. 8 Tumoren gelangten unmittelbar postoperativ zur Untersuchung. Hiervon ließen sich 7 mit einem Antiserum gegen Insulin und Schweine-C-Peptid, nicht aber mit einem Antiserum gegen Glucagon anfärben. Dagegen reagierte ein B-Zellcarcinom mit einer sehr niedrigen Insulinkonzentration mit keinem dieser Seren. Bereits ein Jahr nach der Einbettung in Paraffin ließ die Anfärbbarkeit dieser Tumoren mit einem Antiinsulinserum deutlich nach, während die Inseln des umgebenden normalen Pankreas mit dem gleichen Serum unverändert stark reagierten. — Von 6 weiteren Inseladenomen standen außerdem 1– 4 Jahre altes paraffineingebettetes Tumor- und Pankreasgewebe zur Verfügung. 4 dieser Tumoren hatten eine erhöhte Insulinkonzentration, reagierten immunhistologisch jedoch mit einem Antiinsulinserum nur schwach. Die beiden restlichen Tumoren — einer mit einer hohen, der andere mit einer niedrigen Insulinkonzentration — verhielten sich immunhistologisch negativ. Im Gegensatz zu den Tumoren ließen sich die Inseln des umgebenden Pankreas sämtlicher 6 Fälle mit einem Insulinantiserum gut anfärben. Somit scheint der erfolgreiche immunhistologische Nachweis von Insulin in insulinproduzierenden Tumoren von der Dauer der Einbettung des Tumormaterials in Paraffin abzuhängen. Das Insulin in den Pankreasinseln unterliegt dagegen diesem „Alterungseffekt“ nicht. — TumorInsulin läßt sich nur in Bouin-fixiertem, nicht aber in Karnovsky-fixiertem Gewebe immunhistologisch nachweisen, während das Insulin des normalen Pankreas auch nach Karnovsky-Fixation immunhistologisch nachweisbar ist. Die Befunde sprechen für Unterschiede zwischen normalem pankreatischen und Tumor-Insulin. — Die Färbung der B-Zellen von Tumoren mit Aldehyd-Thionin gelingt seltener als der immunhistologische Nachweis von Insulin in diesen Zellen. Die immunhistologische Untersuchung ist daher zur Identifizierung von B-Zelltumoren den üblichen spezifischen Färbungen überlegen.
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Arnold, R., Deuticke, U., Frerichs, H. et al. Immunohistologic investigations of human insulinomas. Diabetologia 8, 250–259 (1972). https://doi.org/10.1007/BF01225568
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