Application of thin-layer chromatography on purification, separation, and quantitative determination of steroid metabolites

Summary

The behaviour of model steroids, 17-ketosteroid formates, acetates, bromides, and dinitrophenylhydrazones, and of extracts obtained from biological material has been studied by means of thin-layer chromatography.

Although oestrogens excreted in the urine were readily separable on thin layers, their recovery was unsatisfactory. Thin-layer chromatography has not proved suitable for the separation of the individual urinary 17-ketosteroids. However, it was suitable for the determination of dehydroepiandrosterone and androsterone in peripheral blood. The principle of a method for the determination of individual pregnanetriols has been described. Thin-layer chromatography was well suited for the separation of cortisol, cortisone and aldosterone from urinary aspecific chromogens.

Zusammenfassung

Das Verhalten von Modellsteroiden, 17-Ketosteroidformiaten, -acetaten,-bromiden und -dinitrophenylhydrazonen sowie von Extrakten aus biologischem Material wurde dünnschichtchromatographisch untersucht. Wiewohl mit dem Harn ausgeschiedene Östrogene auf Dünnschichten gut trennbar sind, konnten sie nicht in befriedigender Weise aufgefunden werden. Die Dünnschichtchromatographie eignet sich nicht für die Auftrennung der einzelnen 17-Ketosteroide im Harn, hingegen für die Bestimmung von Dehydroepiandrosteron und Androsteron in peripherem Blut. Das Prinzip einer Bestimmungsmethode für einzelne Pregnantriole wurde beschrieben. Die Dünnschichtchromatographie eignet sich gut zur Trennung von Cortisol, Cortison und Aldosteron von unspezifischen Harnchromogenen.

Résumé

On a étudié par chromatographie en couche mince le comportement de stéroïdes de référence, formiates, acétates, bromures et dinitrophenylhydrazones des cétostéroïdes en C₁₇ et d'extraits obtenus à partir d'une substance biologique.

Bien que l'on puisse séparer rapidement sur couche mince les oestrogènes éliminés dans l'urine, leur récupération n'a pas été satisfaisante. La Chromatographie en couche mince ne s'est pas montrée apte à la séparation des cétostéroïdes en C₁₇ sur l'urine individuelle. Elle donne cependant de bons résultats pour le dosage de la déhydro-épiandrostérone et de l'androstérone dans le sang périphérique. On a décrit le principe d'une méthode de dosage des pregnanetriols individuels. La chromatographie en couche mince convient bien pour la séparation du cortisol, de la cortisone et de l'aldostérone des chromogènes urinaires non spécifiques.