Summary
Serum globulin fractions isolated by gel filtration from fasting bovine sera with simultaneous exclusion of low molecular endogenous immunoreactive insulin (IRI), were found to contain immunoreactive insulin-like material in quantities which equal or surpass the directly assayable IRI content of native fasting sera. In one additional and clearly aberrant serum, independently isolated globulin fractions were found to contain 306 μU of IRI per ml of serum, and appeared to exert an equivalent antibody-suppressible insulin-like activity (ILA) on rat adipose tissuein vitro. The IRI content of the native serum amounted to 15 μU/ml and its suppressible ILA content to 46 μU/ml. The presence of insulin-binding antibodies and accidental contamination with crystalline insulin could be excluded. It is suggested that in addition to low molecular IRI which reflects the insulin response to glucose loading, normal bovine serum may contain small basal levels of a high molecular globulin-associated form of IRI, which may be subject to pathologic elevation.
Résumé
Des fractions globuliniques du sérum ont été isolées par filtration sur gel à partir de 10 sérums de boeuf à jeun, avec exclusion simultanée de l'insuline immunoréactive endogène de faible poids moléculaire (IRI). On a trouvé que ces fractions contenaient du matériel immunoréactif semblable à l'insuline en quantités égales ou dépassant le contenu en IRI directement dosable de sérums naturels à jeun. Dans un sérum supplémentaire et nettement aberrant, on a trouvé que des fractions globuliniques isolées indépendamment contenaient 306 μU d'IRI par ml de sérum et exerçaient une activité insulinique (ILA), supprimable par les anticorps, équivalente, sur le tissu adipeux du ratin vitro. Le contenu en IRI du sérum naturel était de 15 μU/ml et son contenu en ILA supprimable était de 46μU/ml. La présence d'anticorps liant l'insuline et une contamination accidentelle avec de l'insuline cristalline ont pu être exclues. Il est suggéré qu'en plus de l'IRI de faible poids moléculaire qui reflète la réponse de l'insuline à une charge en glucose, le sérum normal de boeuf peut contenir de faibles taux de base d'une forme d'IRI associée aux globulines de poids moléculaire élevé, qui peut être sujette à une élévation pathologique.
Zusammenfassung
Globulinfraktionen wurden aus 10 Seren von nüchternen Rindern durch Gelfiltration isoliert unter gleichzeitigem Ausschluß von kleinmolekularem endogenem immunoreaktivem Insulin (IRI). In diesen Fraktionen wurde immunoreaktive-insulinähnliche Aktivität nachgewiesen in Quantitäten, welche sich dem direkt meßbaren IRI-Gehalt von nativ nüchteren Seren annähern oder ihn übertreffen. In einem zusätzlichen und deutlich abweichenden Serum zeigten unabhängig voneinander isolierte Globulinfraktionen einen Gehalt von 306 μE IRI pro ml Serum, und wurde eine gleichwertige, antikörperhemmbare insulinähnliche Aktivität am Fettgewebe der Rattein vitro nachgewiesen. Der IRI Gehalt des nativen Serums betrug 15 μE und sein Gehalt an hemmbarer ILA 46 μE pro ml. Die Gegenwart von insulinbindenden Antikörpern und eine zufällige Verunreinigung mit Kristallinsulin konnten ausgeschlossen werden. Die Daten lassen annehmen, daß außer dem kleinmolekularen IRI, welches die Insulinreaktion auf Glucosebelastung darstellt, normales Rinderserum geringe Basalspiegel einer großmolekularen globulinassoziierten Form von IRI enthalten kann, welche pathologisch erhöht sein kann.
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This work was supported by a grant from the Netherlands Organisation for the Advancement of Pure Research (Z.W.O.).
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Konijnendijk, W., Bouman, P.R. Insulin-like activity and immunoreactive insulin content of gel-filtered protein fractions of bovine serum. Diabetologia 6, 379–385 (1970). https://doi.org/10.1007/BF01212069
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