Summary
We varied an in vitro method described by Rajewsky for measuring the incorporation of tritiated thymidine in tissues and applied our method to tumor tissue to test the effect of different chemotherapeutic agents. We incubated fresh tumor explants of a special size with tritiated thymidin and measured the 3H-activities with the liquid-scintillation-counter. The maximum incorporation at normal atmospheric pressures is reached after about 6–7 hours. This method allows the measuring of the DNA 3H-activities as well as of the non-DNA 3H-activities.
An attempt was made to cultivate tumor slices for several days in semi-solid agar. We succeeded in a few cases only. This method is not suitable for testing chemotherapeutic agents.
The effect of Trisethyleniminobenzochinon (Trenimon) and of Actinomycin C (Sanamycin) on the incorporation of tritiated Thymidine in tumor slices of Jensen Sarcoma depends on the concentration of the drug and the time it is applied. As we expected, Cyclophosphamid (Cytoxan) does not show a change of 3H-activities in high dosages. The same is true for Vincristin blocking the mitosis of the cell. The reason for the accelerated 3H-incorporation with Methotrexat in vitro is discussed.
Zusammenfassung
Eine von Rajewsky angegebene in vitro-Methode zur Messung des 3H-Thymidineinbaues in Gewebeexplantate wurde von uns variiert und auf Tumorgewebe angewendet, um die Wirkung verschiedener Cytostatica zu testen. Dabei wurden frische Tumorexplantate bestimmter Größe mit 3H-Thymidin inkubiert und die 3H-Aktivitäten mit Hilfe der Flüssigkeits-Szintillations-Spektrometrie gemessen. Das Maximum der Inkorporation von 3H-Thymidin wird bei Luftatmosphäre nach etwa 6–7 Std erreicht. Die Methode gestattet es, sowohl die DNS-gebundenen 3H-Aktivitäten als auch die nicht DNS-gebundenen 3H-Aktivitäten zu messen.
Der Versuch, Tumorstückchen über mehrere Tage in einem halbfesten Nährmedium zu kultivieren, um den 3H-Thymidineinbau in sich teilendem Gewebe zu messen, gelang nur in sehr wenigen Fällen. Diese Methode ist somit für die Testung von Cytostatica ungeeignet.
Die Wirkung von Trisäthyleniminobenzochinon (Trenimon) und von Actinomycin C (Sanamycin) auf den Einbau von 3H-Thymidin in Tumorstückchen von Jensen-Sarkom ist deutlich abhängig von der angewendeten Konzentration undder zeitlichen Dauer der Einwirkung des Medikamentes. Cyclophosphamid (Endoxan) läßt erwartungsgemäß auch in hohen Dosen keine Änderung des 3H-Thymidineinbaues erkennen. Das gleiche gilt für den Mitoseblocker Vincristin.
Die Ursachen der Proliferationssteigerung durch Methotrexat im in vitro-Versuch werden besprochen.
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Wüst, G.P., Matthes, K.J. In vitro-Messung des Einbaues von 3H-Thymidin in Jensen Sarkom unter Cytostaticaeinwirkung mit Hilfe der Flüssigkeits-Szintillations-Spektrometrie. Z Krebs-forsch 73, 204–214 (1970). https://doi.org/10.1007/BF00524399
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DOI: https://doi.org/10.1007/BF00524399