Verbesserte Methoden zum Nachweis und zur Bestimmung geringer Mengen von Imipramin (Tofranil) und einiger seiner Metaboliten

Summary

• 1. The sensitivity of the azo- and the H₂SO₄-reagent for the determination of imipramine and its metabolites on paper chromatograms was increased. The increase in sensitivity with the azo-reagent was about 20× for imipramine, 10× for desmethylimipramine, 10× for didesmethylimipramine and 5× for iminodibenzyl, and with the modified H₂SO₄-reagent about 20× for imipramine, 10 × for desmethylimipramine, 8× for didesmethylimipramine and 2× for iminodibenzyl.

• 2. A method is described to stabilize the colour compound formed by the H₂SO₄ reagent with the imipramine.

• 3. The reaction products of both reagents with imipramine and its metabolites were eluated and investigated spectrophotometrically.

• 4. The HCl-eluates are rather unstable with the exception of iminodibenzyl. A characteristic change in colour is observed when eluating iminodibenzyl with methanol.

  Since the eluates obtained from the chromatograms with the H₂SO₄-reaction are unstable they could not be eluated quantitatively. With a new method they are converted into an stable colour compound.

• 5. The azo-reagent as well as the H₂SO₄-reagent are of a high specifity. No reaction was observed with aqueous extracts of various organs of untreated rats.

• 6. The direct determination on paper chromatograms with the H₂SO₄-reagent is the most suitable method if only small amounts of imipramine and its metabolites are available.

Zusammenfassung

• 1. Die Empfindlichkeit des Azo- und des H₂SO₄-Reagenses zum Nach weis des Imipramin und einiger seiner Metaboliten auf Papier-Chromatogrammen wurde gesteigert. Empfindlichkeitssteigerung mit dem Azo Reagens: Imipramin ca. 20mal, Desmethylimipramin ca. 10mal, Didesmethylimipramin ca. 10 mal und Iminodibenzyl. ca. 5 mal. Empfind lichkeitssteigerung mit der modifizierten H₂SO₄-Reaktion: Imipramin ca. 20 mal, Desmethylimipramin ca. 10 mal, Didesmethylimipramin ca. 8 mal und Iminodibenzyl ca. 2mal.

• 2. Es wird ein Verfahren angegeben, den Farbkomplex, den das H₂SO₄ Reagens mit dem Imipramin bildet, zu stabilisieren.

• 3. Die Reaktionsprodukte beider Reagentien mit dem Imipramin und seinen untersuchten Metaboliten wurden aus den Papier-Chromatogrammen eluiert und spektralphotometrisch untersucht.

• 4. Die HCl-Eluate des Azo-Reagenses sind mit Ausnahme des Iminodibenzyl recht instabil. Beim Eluieren des Iminodibenzyl mit Methanol kommt es zu einem charakteristischen Farbumschlag.

  Die Eluate, die nach der H₂SO₄-Reaktion aus den Chromatogrammen gewonnen wurden, sind mit Ausnahme des Iminodibenzyl instabil und konnten daher nicht quantitativ ausgewertet werden. Es wird eine Methode angegeben sie in stabile Farbkomplexe zu überführen.

• 5. Sowohl das Azo- als auch das H₂SO₄-Reagens verfügen über eine hohe stoffliche Spezifität. Sie gaben keine Reaktion mit wäßrigen Extrakten aus verschiedenen Organen unbehandelter Ratten.

• 6. Zur quantitativen Bestimmung von geringen Mengen Imipramin und seinen Metaboliten in Organextrakten wird der direkte papier-chromatographische Nachweis mit dem H₂SO₄-Reagens empfohlen.