Skip to main content
SpringerLink
Log in

Autoradiographische Untersuchungen zum Thymidin-Einbau nach mehrstündiger Inkubation von Rattenlebern

Autoradiographic investigations of thymidine-incorporation after long-time incubation of rat-liver

  • Published:
Histochemie Aims and scope Submit manuscript

    We’re sorry, something doesn't seem to be working properly.

    Please try refreshing the page. If that doesn't work, please contact support so we can address the problem.

Summary

With autoradiographic methods in vivo and in vitro on 85 livers of 2-week-old rats it was studied, if the labeling index and the duration of DNA-synthesis phase after long-time incubation of liver with radioactive thymidine, are comparable with those after in vivo labeling with H-3-thymidine.

The results show, that up to an incubation time of three hours the thymidine-incorporation per nucleus, the labeling index and the duration of the S-phase are comparable with those of in vivo labeling. After an incubation time of more than three hours the incorporation of thymidine into the nucleus decreases and the DNA-synthesis time is much longer than under in vivo conditions.

Zusammenfassung

An 85 Lebern von 14 Tage alten Ratten wurde durch in vivo- und in vitro-Versuche mit der autoradiographischen Methodik geprüft, ob nach mehrstündiger Inkubation von Gewebsstreifen in H-3-thymidinhaltigem Nährmedium die Markierungsindices und die DNS-Synthesephasen den Werten entsprechen, die nach in vivo-Markierung mit H-3-Thymidin erhalten werden.

Die Untersuchungen haben ergeben, daß bis zu einer 3stündigen Inkubation der Thymidineinbau, d.h. die Silberkorndichte, der Markierungsindex und die DNS-Synthesephasedauer der Hepatocyten in vivo-Werten gleichen. Nach längeren Inkubationszeiten sinkt die Thymidineinbaurate erheblich ab. Die DNS-Synthesephase verlängert sich nach einer 8stündigen Lebergewebsinkubation um das 4fache der Norm.

This is a preview of subscription content, log in via an institution to check access.

Access this article

Log in via an institution

Price excludes VAT (USA)
Tax calculation will be finalised during checkout.

Instant access to the full article PDF.

Institutional subscriptions

Similar content being viewed by others

Literatur

  • Bickis, I.J., Henderson, I.W.D.: Biochemical studies of human tumors. I. Estimation of tumor malignancy from metabolic measurements in vitro. Cancer (Philad.) 19, 89–102 (1966).

    Google Scholar 

  • Bond, V.P., Fliedner, T.M., Cronkite, E.P., Rubini, J.R., Brecher, G., Schork, P.K.: Proliferative potentials of bone marrow and blood cells studied by in vitro uptake of H-3- thymidine. Acta haemat. (Basel) 21, 1–15 (1959).

    Google Scholar 

  • Burke, P. J., Owens, A. H., Jr.: Attempted recruitment of leukemic myeloblasts to proliferative activity by sequential drug treatment. Cancer (Philad.) 28, 830–836 (1971).

    Google Scholar 

  • Choné, B., Frischbier, H. J.: In-vivo-Untersuchungen mit H-3-Thymidin zum Studium der Tumorzellkinetik in Punktaten. Sdbd. zur Strahlentherapie 52, 156–165 (1963).

    Google Scholar 

  • Christophers, E., Schaumlöffel, E.: Zur DNS-Synthesezeit in der menschlichen Epidermis. Arch. klin. exp. Derm. 228, 57–64 (1967).

    Google Scholar 

  • Cripps, D. J., Ramsay, C. A., Carter, J., Boutwell, R.K.: Effect of monochromatic UV radiation on DNA synthesis with in vivo and in vitro autoradiography. J. invest. Derm. 58, 312–314 (1972).

    Google Scholar 

  • Deschner, E.E., Lipkin, M., Solomon, C.: Study of human rectal epithelial cells in vitro. II. H-3-thymidine incorporation into polyps and adjacent mucosa. J. nat. Cancer Inst. 36, 849–857 (1966).

    Google Scholar 

  • Fabrikant, J.I.: The kinetics of cellular proliferation in normal and malignant tissues. XI. Estimation of DNA synthesis time in human tissues. Radiology 95, 691–693 (1970).

    Google Scholar 

  • Fettig, O., Sievers, R.: H-3-Index und mittlere Generationszeit des menschlichen Portiokarzinoms und seiner Vorstufen. Beitr. path. Anat. 133, 83–100 (1966).

    Google Scholar 

  • Helpap, B.: Autoradiographische Untersuchungen an Transplantationstumoren zur Frage der Vergleichbarkeit des nuklearen Einbaus von markiertem Thymidin unter „in vivo“- und „in vitro“-Bedingungen. Habilitationsschrift, Marburg (1968).

  • Helpap, B., Maurer, W.: Bemerkungen zu autoradiographischen Untersuchungsmethoden von Excisionsgeweben in vitro mit H-3-Thymidin. Verh. dtsch. Ges. Path. 51, 262–265 (1967).

    Google Scholar 

  • Helpap, B., Maurer, W.: Autoradiographische Untersuchung über die Übereinstimmung von Autoradiogrammen nach Inkubation von Gewebsproben mit H-3-Thymidin und nach Injektion von H-3-Thymidin. Acta histochem. (Jena), Suppl. 8, 99–105 (1968).

    Google Scholar 

  • Helpap, B., Maurer, W.: Autoradiographische Untersuchung zur Frage der Vergleichbarkeit des Einbaus von markiertem Thymidin unter in vivo-Bedingungen und bei Inkubation von Gewebsproben. Virchows Arch. Abt. B 4, 102–118 (1969).

    Google Scholar 

  • Hilscher, W., Maurer, W.: Autoradiographische Bestimmung der Dauer der DNS-Verdopplung und ihres zeitlichen Verlaufs bei Spermatogonien der Ratte durch Doppelmarkierung mit C-14- und H-3-Thymidin. Naturwissenschaften 49, 352–354 (1962).

    Google Scholar 

  • Johnson, H.A., Bond, V.P.: A method of labeling tissues with tritiated thymidine in vitro and its use in comparing rates of cell proliferation in duct epithelium, fibroadenoma, and carcinoma of human breast. Cancer (Philad.) 14, 639–643 (1961).

    Google Scholar 

  • Kaye, G.I., Maenza, R.M., Lane, N.: Cell replication in rabbit gall bladder. An autoradiographic study of epithelial and associated fibroblast renewal in vivo and in vitro. Gastroenterology 51, 670–680 (1966).

    Google Scholar 

  • Klein, H.O., Gross, R., Lennartz, K.J.: Untersuchungen zur Proliferationskinetik und Synchronisation menschlicher Tumorzellen. Ihre Bedeutung für die cytostatische Therapie. Verh. dtsch. Ges. inn. Med. 77, 738–741 (1971).

    Google Scholar 

  • Klein, H.O., Lennartz, K.J., Gross, R.: Möglichkeiten der pharmakologischen Synchronisation der Tumorzellproliferation und ihre Bedeutung für die cytostatische Behandlung. Vortrag Symposion Onkologie. Münster 1972.

    Google Scholar 

  • Klein, H. O., Lennartz, K.J., Eder, M., Gross, R.: In vitro Verfahren zur autoradiographischen Bestimmung der Zellkinetik der Erythroblasten bei Tier und Mensch. Histochemie 21, 369–382 (1970).

    Google Scholar 

  • Klein, H. O., Lennartz, K. J., Gross, R., Eder, M., Fischer, R.: In-vivo- und In-vitro-Untersuchungen zur Zellkinetik und Synchronisation menschlicher Tumorzellen. Dtsch. med. Wschr. 97, 1273–1282 (1972).

    Google Scholar 

  • Klein, H. O., Lennartz, K.J., Teichmüller, W., Gross, R.: Cytotatic treatment of partially synchronized tumor cells in animals and men. VIIth Int. Congr. of Chemotherapy Prag 1971. Abstract-Volume II, B-5/10, Proceedings, im Druck.

  • Kondo, T.: Prediction of response of tumor and host to cancer chemotherapy. Nat. Cancer Inst. Monogr. 34, 251–257 (1971).

    Google Scholar 

  • Kummer, D.: Cytostatika-Sensibilitätstest solider, maligner Tumoren in vitro zur gezielten kombinierten operativen und chemotherapeutischen Behandlung des Krebsleidens. Z. Krebsforsch. 76, 124–139 (1971).

    Google Scholar 

  • Lala, P. K., Maloney, M. A., Patt, H. M.: Measurement of DNA-synthesis time in myeloiderythroid precursors. Exp. Cell Bes. 38, 626–634 (1965).

    Google Scholar 

  • Lennartz, K. J., Klein, H. O., Feáux De Lacroix, W., Klein, P. J.: Vergleichende in vivo- und in vitro-Untersuchung der Zellkinetik experimenteller Tumoren und die Bestimmung des Generationszyclus von Tumorzellen des Menschen in vitro. Verh. dtsch. Ges. Path. 55, 591–596 (1971).

    Google Scholar 

  • Lesch, R., Schiessle, W., Oehlert, W.: Autoradiographische Untersuchungen zur DNS-Synthese an menschlichem Excisionsmaterial aus dem Bronchialbaum. Beitr. path. Anat. 129, 296–306 (1963).

    Google Scholar 

  • Lieb, L.M., Lisco, H.: In vitro uptake of tritiated thymidine by carcinoma of the human colon. Cancer Res. 26, 733–740 (1966).

    Google Scholar 

  • Liss, E., Palme, G.: Der Einfluß von alkylierenden Cytostatica auf den Nukleinsäurestoffwechsel von Ehrlich Ascites Tumorzellen. Z. Krebsforsch. 66, 196–206 (1964).

    Google Scholar 

  • Oehlert, W., Dörmer, P., Lesch, R.: Autoradiographische Untersuchungen über die DNS-Synthese im überlebenden Tumorgewebe des Menschen. Beitr. path. Anat. 128, 468–480 (1963).

    Google Scholar 

  • Prager, M.D.: Prediction of response to L-Asparaginase therapy. Nat. Cancer Inst. Monogr. 34, 257–262 (1971).

    Google Scholar 

  • Quastler, H., Sherman, F. G.: Cell population kinetics in the intestinal epithelium of the mouse. Exp. Cell Res. 17, 420–438 (1959).

    Google Scholar 

  • Rajewsky, M. F.: Zellproliferation in normalen und malignen Geweben: H-3-Thymidin-Einbau in vitro unter Standardbedingungen. Biophysik 3, 65–93 (1966).

    Google Scholar 

  • Robinson, J.W.L., Felber, J.-P.: The effect of tissue ageing on intestinal uptake of aminoacids in vitro. Gastroenterologia (Basel) 105, 17–26 (1966).

    Google Scholar 

  • Rubini, J. R., Keller, S., Cronkite, E. P.: In vitro DNA labeling of bone marrow and leukemic blood leukocytes with tritiated thymidine. I. Physikal and chemical factors which affect autoradiographic cell labeling. J. Lab. clin. Med. 66, 483–492 (1965).

    Google Scholar 

  • Sako, K., Marchetta, F.C.: Radioautography of in vitro labeled tumor cells in postoperative wound drainage. Cancer (Philad.) 19, 735–737 (1966).

    Google Scholar 

  • Schmid, J.R., Oechslin, R. J., Frick, P. G., Moeschlin, S.: Cell proliferation in leukemia during relapse and remission. II. DNA synthesis of leukemic cells in the peripheral blood in vitro. Acta haemat. (Basel) 37, 16–31 (1967).

    Google Scholar 

  • Schultze, B., Maurer, W.: Studies on cell proliferation of liver epithelia in 3-week-old rats. J. Microscopy 96, 219–225 (1972).

    Google Scholar 

  • Seidel, H.-J., Wegner, L. A.: Zur Sensibilitätsbestimmung von Tumoren in vitro. I. Vergleichende Untersuchungen am Jensen-Sarkom in vivo und bei 1stündiger Incubation in vitro. Z. Krebsforsch. 72, 105–118 (1969).

    Google Scholar 

  • Sky-Peck, H.H.: Effects of chemotherapy on the incorporation of H-3-thymidine into DNA of human neoplastic tissue. Nat. Cancer Inst. Monogr. 34, 197–203 (1971).

    Google Scholar 

  • Steel, G.G., Bensted, J.P.M.: In vitro studies of cell proliferation in tumours. I. Critical appraisal of methods and theoretical considerations. Europ. J. Cancer 1, 275–279 (1965).

    Google Scholar 

  • Stöcker, E., Butter, D.: Die DNS-Synthese in Leber und Niere junger Ratten. Autoradiographische Untersuchungen mit H-3-Thymidin. Experientia (Basel) 24, 704–705 (1968).

    Google Scholar 

  • Takahashi, T., Takeno, Y., Takaki, R., Kajiyama, T., Takii, M.: Screening of carcinostatic agents in organ culture. Gann 59, 397–403 (1968).

    Google Scholar 

  • Titus, J.L., Shorter, R. G.: Labeling of human tumors with tritiated thymidine. Arch. Path. 79, 324–328 (1965).

    Google Scholar 

  • Trepel, F., Rastetter, J., Theml, H., Stockhusen, G.: Nukleinsäuresynthese und Zytostatikawirkung in pathologischen Lymphknotenzellen. Med. Klin. 61, 618–622 (1966).

    Google Scholar 

  • Veenema, R. J., Fingerhut, B., Girgis, A. S.: Histochemistry: A possible guide to therapy of bladder tumors. J. Urol. (Baltimore) 90, 736–746 (1963).

    Google Scholar 

  • Volm, M., Kaufmann, K., Hinderer, H., Goerttler, Kl.: Schnellmethode zur Sensibilitätstestung maligner Tumoren gegenüber Cytostatica. Klin. Wschr. 48, 374–376 (1970).

    Google Scholar 

  • Wolberg, W.H., Ansfield, F. J.: The relation of thymidine labeling index in human tumors in vitro to the effectiveness of 5-fluorouracil chemotherapy. Cancer Res. 31, 448–450 (1971).

    Google Scholar 

  • Wrba, H., Rabes, H., Merker, K.F., Doerr, P.: Zur Bedeutung des O2-Partialdruckes für die quantitative Bestimmung des Einbaues von radioaktiv markierten Verbindungen in Organexplantate. Exp. Cell Res. 45, 167–177 (1966).

    Google Scholar 

  • Wüst, G.P., Matthes, K.J.: In vitro Messung des Einbaues von H-3-Thymidin in Jensen-Sarkom unter Cytostaticaeinwirkung mit Hilfe der Flüssigkeitsszintillationsspektrometrie. Z. Krebsforsch. 73, 204–214 (1970).

    Google Scholar 

  • Yanagita, T., Herman, G.G., Gusberg, S.B.: Autoradiographic studies in cervical cancer before and after a test dose of irradiation. Amer. J. Obstet. Gynec. 95, 1051–1058 (1966).

    Google Scholar 

Download references

Author information

Authors and Affiliations

  1. Pathologisches Institut der Universität Bonn, Deutschland

    B. Helpap, R. Stiens & V. Grouls

Authors
  1. B. Helpap
    View author publications

    You can also search for this author in PubMed Google Scholar

  2. R. Stiens
    View author publications

    You can also search for this author in PubMed Google Scholar

  3. V. Grouls
    View author publications

    You can also search for this author in PubMed Google Scholar

Additional information

Mit Unterstützung durch das Landesamt für Forschung Nordrhein-Westfalen, Düsseldorf. Fräulein U. Merkel und Dr. K. Yamashita danken wir für die Mitarbeit.

Rights and permissions

Reprints and permissions

About this article

Cite this article

Helpap, B., Stiens, R. & Grouls, V. Autoradiographische Untersuchungen zum Thymidin-Einbau nach mehrstündiger Inkubation von Rattenlebern. Histochemie 34, 305–316 (1973). https://doi.org/10.1007/BF00306302

Download citation

  • Received:

  • Issue Date:

  • DOI: https://doi.org/10.1007/BF00306302

Search

Navigation