Eine neue Methode zur Carboxyhämoglobinbestimmung in flüssigem und getrocknetem Blut mittels Fourier-Transform-Infrarot-Spektrometrie (FTIR)

Summary

A new technique is presented for the fast quantitative determination of carboxy-hemoglobin (CoHb) in liquid blood with the aid of Fourier transformation infrared spectrometry.

The bands at v=1953 and 1969 (cm⁻¹), which are characteristic for the CoHb complex, were measured without the blood being prepared. In liquid samples the band at 1953 cm⁻¹ is prominent; in dry samples, however, it appears. In moist samples both bands—each to be coordinated with a different CoHb conformer—are observed at about the same intensity. Even with dried blood spots of less than 0.1 mg, quantitative determination of CoHb at v=1969 (cm⁻¹) is possible. Systematic investigations of the thermic stability of the CoHb complex were performed.

The typical interference phenomena associated with UV spectrometry were not observed when the above-described method was employed nor are they to be expected.

Even under extreme measuring conditions, as for example when measuring transmission through lab-coat material, different CoHb contents could be determined in traces of dried blood.

Zusammenfassung

Es wird eine neue Methode zur schnellen quantitativen Bestimmung von Carboxyhämoglobin (COHb) in flüssigem Blut mittels der FTIR-Technik vorgestellt.

Die für den COHb-Komplex charakteristischen Banden bei v=1953 und 1969 (cm⁻¹) wurden ohne Präparation des Blutes ausgemessen. In flüssigen Proben tritt die Bande bei 1953 cm⁻¹ sehr stark hervor, in trockenen verschwindet sie.

In feuchten Proben können beide, verschiedenen COHb-Konformeren zuzuordnenden Banden, in etwa gleicher Intensität beobachtet werden.

Selbst an minimalen getrockneten Blutspuren mit einer Menge von weniger als 0,1 mg lassen sich bei v=1969 (cm⁻¹) quantitative COHb-Bestimmungen durchführen.

Es wurden systematische Untersuchungen zur thermischen Beständigkeit des COHb-Komplexes durchgeführt. Die beim Einsatz von UV-spektrophotometrischen Methoden typischerweise auftretenden Störungen wurden hier nicht beobachtet und sind bei der angewandten Methode auch nicht zu erwarten.

Selbst bei außergewöhnlichen Meßbedingungen wie Transmissionsmessung durch Kittelstoff waren in eingetrockneten Blutflecken unterschiedliche COHb-Gehalte nachzuweisen.