Détermination du taux individuel de filtration glomérulaire des néphrons accessibles et inaccessibles à la microponction

Summary

We describe a modification of Hanssen's technique. Anesthetized rats were infused with a¹⁴C−Na-ferrocyanide solution. At equilibrium, 20 μl of a 10% non labelled ferrocyanide solution were injected as a short pulse above the left renal artery. A few seconds later, the left renal pedicle was tied. Ferrocyanide contained within the kidney was precipitated as insoluble Prussian blue and the proximal tubules were microdissected after maceration. From the radioactivity contained within the nephron from the glomerulus to the precipitate of non labelled ferrocyanide (radioactivity which is due to the¹⁴C filtered during a given time) and from the¹⁴C plasmatic concentration, we deduced the single glomerular filtration rate (SGFR) of the nephron.

Three non diuretic rats are given as example. The SGFR of superficial and juxtamedullary nephrons was respectively equal to 29,1 nl/min and 40,1 nl/min when calculated for the mean value of the length of their proximal tubules (respectively 7.6 mm and 8.9 mm) from the equation of the regression line which described the correlation between SGFR and the length of the proximal tubule.

The reliability of the technique is supported 1. by the fact that the value of the GFR of the whole kidney calculated from SGFR's was the same asC _in measured just prior, 2. by the fact that SGFR values and the anatomo-physiological correlations were identical to those obtained with the Hanssen's technique, 3. and by the fact that the SGFR of superficial nephrons agree with most of those obtained with the micropuncture techniques.

Most of the criticisms of Hanssen's technique, which arise from the observation that the bolus of labelled precipitate is sometimes inhomogenously distributed from one region of the kidney to another, are not valid here because instead of being injected as a pulse, the¹⁴C-ferrocyanide is infused continuously into the animal. Moreover, our technique allows measurements of SGFR's even in non urine forming kidneys.

Résumé

Nous présentons dans ce travail une modification de la technique de Hanssen qui permet de la rendre quantitative.

Un indicateur glomérulaire marqué (ferrocyanure de sodium¹⁴C) est perfusé à des rats anesthésiés jusqu'à l'obtention d'une concentration plasmatique stable. Puis 20 μl d'une solution à 10% de ferrocyanure non marqué sont injectés rapidement au dessus de l'artère rénale gauche. Quelques secondes plus tard, le pédicule rénal gauche est lié. Le ferrocyanure contenu dans le rein est alors précipité sous forme de bleu de Prusse insoluble, puis les tubules proximaux sont disséqués après macération. De la radioactivité contenue dans le néphron entre le glomérule et le précipité de ferrocyanure non marqué (radioactivité qui correspond donc au¹⁴C ferrocyanure filtré pendant un temps déterminé) et de la concentration plasmatique de cet indicateur, on déduit le débit de filtration (fg) du néphron considéré.

Les résultats obtenus chez trois rats non diurétiques sont donnés à titre d'exemple. La fg de néphrons superficiels et profonds ayant une longueur moyenne de tubule proximal de 7,6 mm et 8,9 mm respectivement a été calculée à partir de l'équation de la droite de régression décrivant la variation de la fg en fonction de la longueur du tubule proximal: elle a été trouvée égale à 29,1 nl/min pour les néphrons superficiels et 40,1 nl/min pour les néphrons profonds.

La validité de la technique est attestée 1. par le fait que la filtration glomérulaire totale du rein, calculée à partir des fg, est sensiblement identique à celle mesurée quelques minutes plus tôt (C _in 2. par le fait que les valeurs des fg ainsi que les corrélations anatomo-fonctionnelles rapportées sont identiques à celles obtenues par la technique de Hanssen, 3. enfin par le fait que les fg des néphrons superficiels sont semblables à celles habituellement mesurées par microponction.

Notre technique conserve tous les avantages de la méthode de Hanssen, mais elle en supprime les inconvénients liés à l'hétérogénéité de distribution dans le rein de l'indicateur marqué puisqu'ici, au lieu d'être administré en une seule injection, le ferrocyanure marqué est perfusé à l'animal; de plus, elle permet une mesure quantitative des valeurs individuelles de fg même sur des reins anuriques.