Frequency and quantity of the parvovirus B19 genome in endomyocardial biopsies from patients with suspected myocarditis or idiopathic left ventricular dysfunction

Zusammenfassung.

n Zusammenfassung Parvovirus B19 (PB19) gilt als Erreger der Myokarditis und als möglicher Auslöser einer Herzinsuffizienz im Kindes- und Erwachsenenalter. In der vorliegenden Studie wurde mittels quantitativer PCR-Analyse (real time PCR) die Häufigkeit und Quantität von PB19-Genom in Endomyokardbiopsien von 80 Patienten mit Verdacht auf Myokarditis oder idiopathischer linksventrikulärer Funktionsstörung und 36 Kontrollenpersonen ermittelt. Das Vorliegen einer Entzündung des Myokards wurde durch histologische (Dallas-Klassifikation) und immunhistologische Untersuchungen der Myokardbiopsien erfasst.

PB19-Virusgenom konnte bei 9 von 80 Patienten (11,2%) bioptisch nachgewiesen werden. Bei 4 von 31 (12,9%) Patienten mit immunhistologisch nachgewiesenen entzündlichen Infiltraten im Myokard und bei 5 von 49 (10,2%) Patienten mit linksventrikulärer Dysfunktion ohne Entzündungszeichen in der Myokardbiopsie. Die Menge viraler PB19-DNA in der Endomyokardbiopsie lag zwischen 30 und 3900 Kopien pro μg zellulärer DNA. Vier Patienten mit dem klinischen Verdacht auf Myokarditis hatten Kopienzahlen für PB19 DNA von 70, 740, 3400 und 3900 pro μg zellulärer DNA in der Endomyokardbiopsie. Fünf Patienten mit idiopathischer linksventrikulärer Dysfunktion ohne entzündliche Infiltrate im Myokard wiesen bioptisch Kopienzahlen für PB19-DNA von 30, 38, 52, 58 und 90 pro μg zellulärer DNA auf. Die Sequenzierung eines der neun positiven PCR-Fragmente zeigte eine identische Sequenz zu den publizierten PB19-VP1/VP2-Genen (NCBI-Genbank). Bei allen Patienten konnte eine akute Myokarditis histologisch nach den Dallas-Kriterien ausgeschlossen werden. Alle Biopsien der 36 Kontrollpersonen, die weder bioptisch eine Myokarditis noch eine positive Anamnese für eine kürzlich durchgemachte Virusinfektion aufwiesen, waren für PB19-DNA negativ.

Zusammengefasst zeigen die vorliegenden Ergebnisse, dass PB19-Virusgenom in Endomyokardbiopsien von Patienten mit Verdacht auf Myokarditis und idiopathischer linksventrikulärer Funktionsstörung mittels real time PCR erfasst und quantifiziert werden kann.

Summary.

Parvovirus B19 (PB19) has been identified as a possible cause of myocarditis and heart failure in both children and adult patients. This study used real time PCR analysis, to determine the frequency and to quantify PB19 viral genomes in endomyocardial tissue samples from 80 adult patients with clinically suspected myocarditis or idiopathic left ventricular dysfunction and from 36 controls. Histological (Dallas classification) and immunohistological analyses were performed to detect myocardial inflammation in the endomyocardial biopsies.

PB19 genomic DNA was found in nine of 80 patients (11.2%), 4 out of 31 (12.9%) patients with inflammatory infiltrates detected via immunohistological methods and 5 out of 49 (10.2%) patients with left ventricular dysfunction without myocardial inflammation. The copy numbers for PB19 DNA ranged between 30 and 3900 per μg of cellular DNA. Four patients with clinically suspected myocarditis had copy numbers for PB19 DNA of 70, 740, 3400 and 3900, respectively, per μg of cellular DNA in the endomyocardial biopsy. Five patients with idiopathic left ventricular dysfunction had copy numbers for PB19 DNA of 30, 38, 52, 58 and 90, respectively, per μg of cellular DNA in the endomyocardial biopsy. The amplicon of one of the nine positive PCR fragment was sequenced and was found to be fully identical in the highly conserved sequence of published Parvovirus B19 VP1/VP2 genes (NCBI gene bank). In all patients, acute myocarditis was excluded according to the Dallas classification. All biopsies of 36 controls with no history of myocarditis or recent viral infection were negative for myocardial inflammation and parvovirus B19 genomes.

In summary, Parvovirus B19 DNA is present within the myocardium of patients with suspected myocarditis and idiopathic left ventricular dysfunction and can be detected and quantified in endomyocardial specimens via real time PCR.