„Field cancerization“– ein zusätzliches Phänomen in der Entwicklung von Colontumoren? K-ras-Codon-12-Mutationen in normaler Colonmucosa von Patienten mit colorectalen Neoplasien

Abstract.

Introduction: The c-K-ras2-gene (K-ras) encodes the p21^ras protein, which participates in the transduction of mitogenic signals from the cell surface to the nucleus. About 40–50 % of colorectal cancers bear a point mutation of the K-ras codon 12 within exon I, leading to activation of the K-ras oncogene. Methods: Using a polymerase chain reaction (PCR)-based two-step restriction fragment length polymorphism (2sRFLP)-technique, we assessed the frequency of point mutations in the first or second base of K-ras codon 12 in patients suffering from colorectal carcinoma, adenoma, and their normal colon mucosa, respectively. Results: Similar to other investigators, we found mutations in 7 out of 17 (41 %) colorectal carcinomas and 1 out of 4 (25 %) adenomas. Using this very sensitive 2sRFLP technique (detection level = 0.2 % of mutated cells), we were able to find K-ras codon 12 mutations in normal mucosa in 4 out of 18 (22.2 %) patients with colorectal neoplasia. Conclusions: This result can be explained by the phenomenon of “field cancerization” or by a local micrometastasis of K-ras-positive tumor cells.

Zusammenfassung.

Einleitung: Das c-K-ras2-Gen (kurz: K-ras) codiert für das p21^ras-Protein, welches an der Transduktion mitogener Signale von der Zelloberfläche zum -kern beteiligt ist. Etwa 40–50 % der colorectalen Carcinome zeigen Punktmutationen des K-ras-Codon-12 im Exon I, die zur Aktivierung des K-ras-Onkogens führen. Methoden: Wir verwendeten eine PCR-gestützte 2-Schritt-Restriktionsfragment-Längenpolymorphismus- (2sRFLP) Technik zum Nachweis einer Punktmutation der ersten beiden Basen des K-ras-Codon-12 in colorectalen Carcinomen, Adenomen und normaler Mucosa von Patienten mit colorectalen Neoplasien. Ergebnisse:Ähnlich wie andere Autoren fanden wir eine Mutation bei 7 von 17 (41 %) colorectalen Carcinomen und einem von 4 (25 %) Adenomen. Mit der sensitiven 2sRFLP (Nachweisgrenze = 0,2 % mutierte Zellen) gelang uns in 4 von 18 (22,2 %) Proben normaler Mucosa von Patienten mit colorectaler Neoplasie ebenfalls der Mutationsnachweis. Schlußfolgerungen: Dies kann entweder durch das Phänomen der „field cancerization“ oder eine Mikrometastasierung K-ras-positiver Tumorzellen erklärt werden.