Microneutralisation systems for use with different strains of peste des petits ruminants virus and rinderpest virus

Summary

Comparative studies were made to determine the most suitable microtitration system for assaying strains of peste des petits ruminants virus (PPRV) and rinderpest virus (RV). Infectivity titres did not differ significantly when assayed in either calf kidney, sheep kidney or Vero cells. However, cytopathic effects were much easier to detect in the latter making them the cell of choice. Addition of small amounts of virus to preformed cell monolayers in microplates with the subsequent addition of maintenance medium give higher infectivity titres than when cell suspension was added to virus, although the latter is more convenient for routine use. The titres of PPRV and neutralising antibodies assayed in tubes and microplates were not significantly different. Simultaneous screening of sera at a 1 in 20 dilution against both PPRV and RV gave a higher incidence of positives against homologous as opposed to heterologous virus.

Résumé

Des études comparatives ont été effectuées pour déterminer la microméthode la mieux adaptée au titrage des souches des virus de la peste des petits ruminants (VPPR) et de la peste bovine (VPB) Les titres d'infectivité n'étaient pas significantivement différents qu'ils soient dosés sur cellules de rein de veau, de rein de mouton ou sur cellules Vero. Cependant, les effects cytopathogènes étaient plus facile à déceler dans les cellules Vero, ce qui en fait les cellules de choix. L'addition de petites quantités de virus aux tapis cellulaires complets en microplaques puis adjonction ultérieure de milieu d'entretien s'est traduit par des titres d'infectivité plus élevés que lorsque le virus était inoculé aux cellules en suspension, bien que cette dernière méthode soit plus commode pour l'utilisation de routine. Les titres du virus de la PPR et des anticorps neutralisants ne se sont pas révélés significativement différents en tubes ou en microplaques. Les examens simultanés de sérums au 1/20 contre à la fois le virus de la PPR et de la PB se tradusient par une fréquence plus élevée de réactions positives aux virus homologues qu'aux virus hétérologues.

Resumen

Se hicieron estudios comparativos para determinar el mejor sistema de microtitulación para detectar cepas del virus de la peste de pequeños rumiantes (VPPR) y virus de rinderpest (VR). Los títulos infectivos, no difirieron significativamente cuando los ensayos se efectuaron en cultivos celulares de riñón de ternero, de oveja y células Vero. Sin embargo, los efectos citopáticos se detectaron más facilmente en este último, haciendo de este cultivo celular el preferencial para pruebas de microtitulación. La adición, de pequeñas poblaciones virables a monocultivos celulares preformados en microplacas, conjuntamente con medio de mantenimiento, dió títulos infectivos más altos, que cuando la suspensión de células se añadió al virus, aunque este último método es más conveniente para trabajos de rutina. Los títulos del VPPR, y los anticuerpos neutralizantes, pruebas determinadas en tubo y microplacas, no difirieron significativamente. El análisis simultáneo de suero en diluciones 1 en 20 contra los virus de Pest de Pequeños Rumiantes y Rinderpest, dió una incidencia más alta de positivos contra el suero homólogo, que contra el heterólogo.