Zusammenfassung
Es werden Puffersysteme für divalente Metallionen beschrieben, die im Bereich von etwa pH 6–10 gegenüber den herkömmlichen Metallpuffern eine bemerkenswert niedrige pH-Abhängigkeit der Metallionenkonzentration und der Pufferkapazität zeigen.
Die Puffersysteme bestehen aus einem starken Komplexbildner (vorzugsweise einer Polyaminocarbonsäure) und zwei verschiedenen, divalenten Metallionen, die bezüglich der Bindung durch den Komplexbildner in Konkurrenz stehen. Dasjenige Metallion, dessen Konzentration gepuffert werden soll, wird als Primärion bezeichnet. Das zweite Ion, das Sekundärion genannt wird, soll vom Komplexbildner mindestens um den Faktor 10–100 schwacher gebunden werden.
Die Gesamtkonzentration des Primärions ist geringer als diejenige des Komplexbildners, während die Summe der Gesamtkonzentrationen der beiden divalenten Metallionen höher ist als diejenige des Komplexbildners.
Die Konzentration des freien Primärions kann in den beschriebenen Puffersystemen auf drei verschiedene Arten variiert werden: 1. durch Änderung der Gesamtkonzentration des Primärions, 2. durch Änderung der Gesamtkonzentration des Sekundärions, und 3. durch die Wahl eines passenden Komplexbildners mit entsprechenden Metallionen- und Protonendissoziationskonstanten.
Abbreviations
- t-CDTA:
-
trans-Cyclohexane-1,2-diamine-tetraacetate
- t-CPDA:
-
trans-1,2-Cyclopentylenedi-[iminodi(acetate)]
- EDTA:
-
Ethylenediamine-N,N,N′, N′-tetraacetate
- EGTA:
-
2,2′-Ethylenedioxybis[ethyliminodi(acetate)]
- HEDTA:
-
N′-(2-Hydroxyethyl)-ethylenediamine-N, N, N′-triacetate.
- OBDA:
-
2,2′-Oxybis[ethyliminodi(acetate)]
- o-PDTA:
-
o-Phenylenediamine-N,N,N′, N′-tetraacetate
- Me2+ :
-
divalent metal ion
- Me 2+1 :
-
‘primary’ metal ion
- Me 2+2 :
-
‘secondary’ metal ion
- [Me2+]:
-
concentration of the free metal ion (not bound by a chelator)
- L:
-
chelator
- n :
-
number of dissociable protons of L
- K:
-
dissociation constant
- KMeL(n−2)−:
-
dissociation constant of the complex MeL(n−2)−
- K1, K2, Kn :
-
proton dissociation constants (definitions see text)
- KMeHL(n−3)− MeHL(n−3)−:
-
proton dissociation constant of the complex
- t :
-
total index
Literatur
B. L. Vallee, inAdvances in Protein Chemistry (Eds.M. L. Anson, K. Bailey andJ. T. Edsall; Academic Press, New York 1955), vol. 10, p. 317.
B. L. Vallee, inThe Enzymes, 2nd edn., (Eds.P. D. Boyer, H. Lardy andK. Myrbäck; Academic Press, New York 1960), vol. 3, part B, p. 225.
B. L. Vallee andJ. E. Coleman, inComprehensive Biochemistry (Eds.M. Florkin andE. H. Stotz; Elsevier, Amsterdam 1964), vol. 12, p. 165.
B. G. Malmström andA. Rosenberg, inAdvances in Enzymology (Ed.F. F. Nord; Interscience, New York 1959), vol. 21, p. 131.
H. V. Wyatt, J. theor. Biol.6, 441 (1964).
L. G. Sillén andA. E. Martell,Stability Constants of Metal-Ion Complexes (The Chemical Society, London 1964); special publ. No. 17.
J. Raaflaub, inMethods of Biochemical Analysis (Ed.D. Glick; Interscience Publishers, Inc., New York 1956), vol. 3, p. 301.
Ch. N. Reilley, Fedn. Proc.20, 22 (1961).
G. Schwarzenbach andH. Flaschka,Die komplexometrische Titration (Ferdinand-Enke-Verlag, Stuttgart 1965).
S. Chaberek andA. E. Martell,Organic Sequenstering Agents (John Wiley and Sons, Inc., New York 1959), p. 174.
This condition can be verified, e.g., if Ca2+ or heavy metal ions as the primary ions are combined with Mg2+ as the secondary ion, EDTA being the ligand. This combination is very useful for the study of some enzymes (e.g. Ca2+-dependent ATPase12-14, alkaline phosphatase15,16), which are only active in the presence of Mg2+ and a second divalent metal ion (Ca2+, Zn2+, respectively), if the second divalent metal ion is present in enzyme-saturating concentrations or if its free ion concentration can be determined at any moment or under any condition.
E. T. Dunham andI. M. Glynn, J. Physiol. Lond.156, 274 (1961).
P. Wins andE. Schoffeniels, Biochim. biophys. Acta120, 341 (1966).
H. U. Wolf, Biochim. biophys. Acta266, 361 (1972).
B. P. Ackermann, Dissertation, Mainz 1972.
J. Ahlers, Dissertation, Mainz 1972.
G. Schwarzenbach, R. Gut andG. Anderegg, Helv. chim. Acta37, 937 (1954).
R. Cohen andJ. B. Wilson, Biochemistry5, 904 (1966).
Y. Ogawa, J. Biochem., Tokyo64, 255 (1968).
Author information
Authors and Affiliations
Additional information
Acknowledgments. The author wishes to thank MissU. Stechert for the design of the graphs. This work was supported by a grant of the Deutsche Forschungsgemeinschaft.
Rights and permissions
About this article
Cite this article
Wolf, H.U. Divalent metal ion buffers with low pH-sensitivity. Experientia 29, 241–249 (1973). https://doi.org/10.1007/BF01945502
Published:
Issue Date:
DOI: https://doi.org/10.1007/BF01945502