Sex determination and DNA competition in the analysis of forensic mixed stains by PCR

Abstract

Sex determination of pure and mixed blood samples and stains was performed by amplification of the X-specific and Y-specific alphoid sequences by PCR (XY-PCR). From mixed blood samples with female DNA present in large excess of male DNA, the Y-specific sequence still amplified efficiently. In the analysis of vaginal secretions in a case of sexual assault, XYPCR was performed to test the efficiency of the selective lysis procedure in order to investigate whether alleles found with other PCR systems were of male or female origin. Our studies with mixed blood samples revealed pronounced DNA competition in the HLA-DQα and D1S80 PCR systems: the alleles from a minor DNA component could not be detected in the presence of a large excess of DNA from a second person.

Zusammenfassung

Für die Geschlechtsbestimmung (XY-PCR) reiner und gemischter Spuren wurden X-spezifische und Y-spezifische Alphoidsequenzen mittels PCR amplifiziert. Aus gemischten Blutproben, wo die Menge an weiblicher DNA viel größer ist als die der männlichen DNA, wurde die Y-spezifische Sequenz immer noch effizient amplifiziert. Bei der Analyse von Spurenmaterial nach einem Sexualdelikt wurde XY-PCR eingesetzt um die Effizienz der selektiven Lyse zu überprüfen und um zu untersuchen, ob Allele, welche in anderen PCR Systemen nachgewiesen wurden, einer weiblichen oder einer männlichen Person zuzuordnen sind. Diese Untersuchungen mit gemischten Blutproben zeigten, daß in den Systemen HLA-DQα und D1S80 starke Kompetition auftrat, wobei die Allele einer DNA, in Anwesenheit eines großen überschuß an DNA einer zweiten Person, nicht mehr nachweisbar waren.