Untersuchungen über das Virus der lymphozytären Choriomeningitis

Zusammenfassung

Das Virus der lymphozytären Choriomeningitis (LCM), Stamm WE₃, ist ungewöhnlich labil. In Phosphat-gepufferter Kochsalzl/:osung bei 37°C und pH 7,0 betrug die Halbwertszeit der Infektiosität 15 bis 20 Minuten. Bei den gleichen Bedingungen hatte Poliovirus Typ 1 erst nach etwa 28 Stunden die Hälfte seiner Infektiosität verloren. Unter einer größeren Anzahl sehr verschiedenartiger Substanzen, welche dem Puffer beigesetzt wurden, schützten nur Albumin, Serum und Haemaccel das Virus. Von diesen erschien Haemaccel für unsere Zwecke am geeignetsten. Zusatz von 0,1% Haemaccel und Eagle's Aminosäuren (die zum weiteren Schutz gegen thermische Inaktivierung beigefügt wurden) zu Phosphat-gepufferter Kochsalzlösung erwies sich als wirksam sowohl bei thermischen Einflüssen (37 °C) als auch bei wiederholtem Frieren und Tauen und der Behandlung mit Ultraschall. Bei pH7 war das Virus stabiler als bei pH 6 oder 8. —Die vonPfau vertretene Meinung, wonach der Verlust der Virusinfektiosität beim Zentrifugieren auf einer reversiblen Verklumpung infektiöser Einheiten beruht, wird durch unsere Befunde nicht gestützt.

Summary

The virus of lymphocytic choriomeningitis (LCM), strain WE₃, is extremely labile; its half-live time at 37°C was found to lie between 15 and 20 minutes when suspended in phosphate-buffered saline at pH 7.0, a figure which contrasts markedly with 28 hours for poliovirus type 1 determined in the same way. In order to permit purification and characterization of the virus, conditions were sought, which would prevent loss of infectivity due to inactivation. Of a variety of substances which were incorporated into the buffer, only albumin, serum, and Haemaccel protected the virus against both, thermal and mechanical effects. Of these, Haemaccel appeared to be most useful; non-antigenic and of relatively small molecular weight (35,000) this substance could be expected to interfere least with experimental manipulations. A diluent, consisting of 0.1% Haemaccel together with Eagle's amino acids (which were included to further aid in protecting against thermal inactivation) in phosphate-buffered saline was more extensively tested and was found to protect the virus against thermal (37°C) as well as mechanical (repeated freezing and thawing and ultrasonication) inactivation. Maintenance of the pH close to 7.0 was found to be essential for optimal stabilization. — The hypothesis that the loss of infectivity upon centrifugation is caused by reversible aggregation of infectious units could not be supported.