Quantitative Bestimmung von Aminen und von Aminosäuren als 1-Dimethylamino-naphthalin-5-sulfonsÄureamide auf Dünnschichtchromatogrammen

Summary

The preparation of several 1-dimethyl-amino-naphthalene-5-sulphonylamides and -phenolic esters is described. The absorption spectra and the fluorescence of these amides and phenolic esters in solvents of different acidity and polarity is discussed. These DANS derivates are used for the quantitative estimation off amines and amino-acids in the range of 10⁻⁸–10⁻¹² M. After separation on thin-layer chromatograms their determination can be carried out either by scraping of the spots followed by extracting the silica gel and measuring the intensity of fluorescence in solution or by spraying the chromatograms with triethanolamine + isopropanol (20 + 80) and direct estimation according to a method described earlier. The minimum amount of DANS derivates which can be still measured with the extraction method was found to be 1 · 10⁻¹⁰ mole/spot, using 5 ml cuvettes, and 5 · 10⁻¹² mole/spot using the direct estimation method. At concentrations of about 1 · 10⁻⁹ mole/spot and 1 · 10⁻¹¹ mole/spot respectively, the reproducibility for both methods is about ±3.5%.

Zusammenfassung

Wir stellten eine Reihe von Amiden und Phenolester der 1-Dimethyl-amino-naphthalin-5-sulfonsÄure (DANS-OH) prÄparativ dar. Die Absorptionsspektren und das Fluorescenzverhalten dieser DANS-Derivate in Lösungsmitteln verschiedener AciditÄt und PolaritÄt wird diskutiert. Diese Derivate dienen zur quantitativen Bestimmung von Aminen und von AminosÄuren im 10⁻⁸ bis 10⁻¹² Mol-Bereich. Nach ihrer Trennung auf Dünnschichtchromatogrammen können entweder die fluorescierenden Flecke ausgekratzt, das Kieselgel extrahiert und die FluorescenzintensitÄt der DANS-Derivate in Lösung bestimmt werden, oder man wertet die Chromatogramme nach dem Besprühen mit TriÄthanolamin-Isopropanol (20∶80) nach einem früher mitgeteilten Verfahren direkt aus. Die Erfassungsgrenze für die DANS-Derivate durch die Extraktionsmethode betrÄgt im Falle der Verwendung von 5 ml-Küvetten etwa 1 · 10⁻¹⁰ Mol/Fleck, im Falle der direkten Auswertung der Dünnschichtchromatogramme 5 · 10⁻¹² Mol/Fleck. Die Reproduzierbarkeit ist für beide Verfahren im Konzentrationsbereich um 1 · 10⁻⁹ Mol/Fleck bzw. um 1 · 10⁻¹¹ Mol/Fleck mit ±3,0 bis 3,5% gleich.