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Voraussetzungen und derzeitige Grenzen der quantitativen elektronenmikroskopischen Autoradiographie bei Kinetikstudien an Drüsenzellen

Elektronenmikroskopisch-autoradiographische Untersuchungen mit 3H-Leucin an der Milchdrüse

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Zeitschrift für Zellforschung und Mikroskopische Anatomie Aims and scope Submit manuscript

Summary

A female mouse, 3 days post partum, was injected with 3H-leucine. After various intervals parts of the mammary gland were processed for electronmicroscopic autoradiograms, the results of which were mathematically evaluated in order to understand the temporal course of milk protein formation. After 5 and 15 minutes the “leucine-activity” is located mainly in the rough endoplasmic reticulum, after 30 minutes in the Golgi field and after 240 minutes in the lumina of the mammary ducts. The “half-live” time of labelled proteins in the rough endoplasmic reticulum is about 22 minutes, in the Golgi field about 3 hours.

The preconditions and limitations of quantitative electronmicroscopic autoradiography are discussed. Because of the many possible sources of error, the calculations of the kinetics of protein synthesis and secretion in the mammary gland are merely regarded as a model.

Zusammenfassung

Einer weiblichen Maus wurde 3 Tage post partum 750 μC 3H-Leucin i. p. injiziert. Zu verschiedenen Zeiten nach der Leucinapplikation wurden dem leicht narkotisierten Tier Gewebeteile der Milchdrüse entnommen und zu elektronenmikroskopischen Autoradiogrammen verarbeitet. An Hand der dabei gewonnenen Ergebnisse wurde versucht, den zeitlichen Ablauf der Milcheiweißbildung rechnerisch zu erfassen. 5 und 15 min nach der 3H-Leucinapplikation kann die Aktivität über dem rauhen endoplasmatischen Retikulum, nach 30 min über dem Golgi-Feld, und nach 240 min zur Hauptsache über den Lumina der Ausführungsgänge beobachtet werden. Die Halbwertszeit von markierten Proteinen im Ergastoplasma errechnete sich zu etwa 22 min, diejenige im Golgi-Feld zu etwa 3 Std.

Die Voraussetzungen und derzeitigen Grenzen einer quantitativen elektronenmikroskopischen Autoradiographie werden diskutiert. Wegen der vielen möglichen Fehlerquellen wird die Berechnung der Kinetik der Milcheiweißbildung lediglich als Modell gewertet.

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Authors and Affiliations

  1. Ludwig Aschoff-Haus, Pathologisches Institut der Universität Freiburg i.Br., Deutschland

    Hanspeter Rohr, Ute Seitter & Jürgen Schmalbeck

  2. Pathologisches Institut, Hebelstraße 24, CH-4000, Basel

    Hanspeter Rohr

Authors
  1. Hanspeter Rohr
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  2. Ute Seitter
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  3. Jürgen Schmalbeck
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Ausgeführt mit Unterstützung durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft.

Wesentliche Teile der Arbeit werden Von Ute Seitter der Medizinischen Fakultät der Universität Freiburg i. Br. als Inaugural-Dissertation vorgelegt.

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Rohr, H., Seitter, U. & Schmalbeck, J. Voraussetzungen und derzeitige Grenzen der quantitativen elektronenmikroskopischen Autoradiographie bei Kinetikstudien an Drüsenzellen. Zeitschrift für Zellforschung 85, 376–397 (1968). https://doi.org/10.1007/BF00328848

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