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Zum Einfrieren von Gewebe in Stickstoff-gekühltem Propan

Quenching of tissue in liquid nitrogen-propane

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Histochemie Aims and scope Submit manuscript

Summary

The quenching in liquid nitrogen-propane can be improved by addition of talcum powder to both, cooling finger and Dewar flask filled with N2. Large tissue blocks (up to 1,5×1,5×0,8 cm) may be used; no artefacts due to formation of big ice crystals are observed. Convection plays an important role in quenching in N2-propane; it is therefore recommended to have the tissue in permanent movement in the cooling bath. — Splitting of the tissue block during quenching is inhibited by wrapping the block with thin plastics. — Artefacts due to recrystallization of the frozen tissue develop within 24 h, if the tissue is stored at -25° C and within 48 h, if stored at -50° C. Diffusion of cate-cholamines develops even more quickly.

Zusammenfassung

Das Einfrieren in Stickstoff-Propan wird durch Talcumzusatz in Kühlfinger und Stickstoffgefäß beschleunigt. Dadurch können größere Gewebsblöcke (bis 1,5×1,5×0,8 cm) ohne lichtmikroskopisch sichtbare Artefakte durch Eiskristallbildung eingefroren werden. Es wird gezeigt, daß bei der Wärmeabgabe aus dem Gewebe die Konvektion neben der Konduktion eine wichtige Rolle spielt und daraus die Forderung abgeleitet, den einzufrierenden Block während des Einfrierens in lebhafter Bewegung zu halten. — Springen der Blöcke kann durch Einwickeln in Kunststoffolie sicher vermieden werden. Verfälschung der histologischen Struktur durch Rekristallisationsvorgänge im eingefrorenen Gewebe sind bei Aufbewahrung bei Temperaturen von -25° C nach 24 Std bei -50° C zuerst nach 48 Std nachweisbar. Diffusion der Katecholamine stellt sich bereits früher ein.

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Winckler, J. Zum Einfrieren von Gewebe in Stickstoff-gekühltem Propan. Histochemie 23, 44–50 (1970). https://doi.org/10.1007/BF00309488

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