Skip to main content
Log in

Elektronenmikroskopische Untersuchungen des ventralen Diaphragmas von Locusta migratoria und der langsamen Kontraktionswelle nach Fixation durch Gefriersubstitution

Electron microscope studies of the ventral diaphragm of Locusta migratoria and of the slow wave of contraction after fixation by freeze substitution

  • Published:
Zeitschrift für Zellforschung und Mikroskopische Anatomie Aims and scope Submit manuscript

Summary

The muscular system of the ventral diaphragm of Locusta consists of parallel muscle fibers, which are connected by structures like intercalated discs within transverse bridges. Each muscle fiber is enveloped by a thick sheath of connective tissue. The fibers are attached to the cuticule by means of hypodermic cells with tonofibrils.

Uncontracted sarcomeres have a length of 5 μm and more. The H-band is slightly indicated, a M-line is not visible. Actin and myosin filaments (diameter 72 respectively 160 AE) are out of register. Moreover there is a third and very thin type of filaments. The Z-band has an undulating shape and collects the actin filaments into bundles. Mitochondria lie on either side of the Z-band. The T-system invaginates as sarcolemmal clefts and continues its course inwards as tubuli. The sarcolemmal clefts are connected with the Z-band. The T-system and the sarcoplasmic reticulum are joined by diads of irregular distribution.

Limitated deprivation of Ca++ causes waves of contraction with the length of several sarcomeres.

Contrary to standard methods the freeze-substitution causes some modifications such as shrinking of the sarcoplasm, thickening of the myosin filaments, vacuolization of mitochondria and vesicular system. Within the waves of contraction the A-band shortenes with increasing sarcomere contraction. The diameter of the myosin filaments measures 172 AE, the 305 AE-period of the cross-bridges remains constant within the middle of the filaments.

Zusammenfassung

Die Muskulatur des ventralen Diaphragmas von Locusta besteht aus parallel verlaufenden Muskelfasern, die über glanzscheibenartige Strukturen in den Querverbindungen miteinander verbunden sind. Jede Muskelfaser ist von einer dicken Bindegewebshülle umgeben. Die Fasern sind über Hypodermiszellen mittels Tonofibrillen in der Cuticula verankert.

Unkontrahierte Sarkomere haben eine Länge von 5 μm und mehr. Eine H-Zone ist angedeutet, eine M-Linie nicht vorhanden. Aktin- und Myosinfilamente (Durchmesser 72 bzw. 160 AE) liegen nicht im Register. Daneben existiert ein dritter, sehr dünner Filamenttyp. Die Z-Zone hat einen gewellten Verlauf und faßt die Aktinfilamente in Bündeln zusammen. Mitochondrien liegen beiderseits der Z-Zone. Das T-System faltet sich in Form von Sarkolemmkerben in das Faserinnere ein und setzt sich in Tubuli nach innen fort. Z-Zonen und Sarkolemmkerben sind miteinander verbunden. T-System und sarkoplasmatisches Retikulum treten durch unregelmäßig verteilte Diaden miteinander in Kontakt.

Begrenzter Ca++-Entzug läßt Kontraktionswellen von der Länge mehrerer Sarkomere entstehen.

Die Fixation durch Gefriersubstitution erzeugt gegenüber Standardverfahren Veränderungen wie Schrumpfung des Sarkoplasmas, Verdickung der Myosinfilamente, Vakuolisierung von Mitochondrien und vesikulärem System. In der Kontraktionswelle verkürzt sich die A-Zone mit zunehmender Sarkomerenkontraktion. Der Durchmesser der Myosinfilamente beträgt 172 AE, die Periodik der „Cross-bridges“ von 305 AE bleibt im mittleren Bereich der Filamente konstant.

This is a preview of subscription content, log in via an institution to check access.

Access this article

Price excludes VAT (USA)
Tax calculation will be finalised during checkout.

Instant access to the full article PDF.

Similar content being viewed by others

Literatur

  • Auber, J.: Remarques sur la structure des fibrilles des muscles du vol d'insectes au niveau de la strie M. C. R. Acad. Sci. (Paris) 264, 2916–2918 (1967).

    Google Scholar 

  • Brandt, P. W., Reuben, J. P., Girardier, L., Grundfest, H.: Correlated morphological and physiological studies on isolated single muscle fibers. I. Fine structure of the crayfish muscle fiber. J. Cell Biol. 25, 233–260 (1965).

    Google Scholar 

  • Crossley, A. C.: The fine structure and mechanism of breakdown of larval intersegmental muscles in the blowfly Calliphora erythrocephala. J. Insect Physiol. 14, 1389–1407 (1968).

    Google Scholar 

  • Epstein, M. H., O'Connor, J. S.: Comparison of liquid propane and liquid nitrogen in tissue preservation. Cryobiology 2, 342–344 (1966).

    Google Scholar 

  • Gilmour, D., Robinson, P. M.: Contraction in glycerinated myofibrils of an insect (Orthoptera, Acrididae). J. Cell Biol. 21, 385–396 (1964).

    Google Scholar 

  • Hagopian, M.: The myofilament arrangement in the femoral muscle of the cockroach, Leucophaea maderae Fabricius. J. Cell Biol. 28, 545–562 (1966).

    Google Scholar 

  • — Spiro, D.: The filament lattice of cockroach thoracic muscle. J. Cell Biol. 36, 433–442 (1968).

    Google Scholar 

  • Hehn, G. v.: Die Muskulatur des Eileiters von Carausius morosus. I. Mitteilung: Histologische Untersuchungen. II. Mitteilung: Lebendbeobachtungen. Z. Zellforsch. 78, 511–554 (1967).

    Google Scholar 

  • Heymann, I.: Die Muskulatur der Malpighischen Gefäße von Carausius morosus. Staats-examensarbeit, Göttingen 1968.

    Google Scholar 

  • Hoyle, G.: Diversity of striated muscle. Amer. Zoologist 7, 435–449 (1967).

    Google Scholar 

  • Hürthle, K.: Über die Struktur der quergestreiften Muskelfasern von Hydrophilus im ruhenden und tätigen Zustand. Pflügers Arch. ges. Physiol. 126, 1–164 (1909).

    Google Scholar 

  • Huxley, A. F.: Muscle structure and theories of contraction. Progr. Biophys. 7, 255–318 (1957).

    Google Scholar 

  • Huxley, H. E.: The double array of filaments in cross-striated muscle. J. biophys. biochem. Cytol. 3, 631–647 (1957).

    Google Scholar 

  • — Electron microscope studies on the structure of natural and synthetic protein filaments from striated muscle. J. molec. Biol. 7, 281–308 (1963).

    Google Scholar 

  • Knappeis, G. G., Carlsen, F.: The ultrastructure of the M line in skeletal muscle. J. Cell Biol. 38, 202–211 (1968).

    Google Scholar 

  • Lax, E., Synowietz, C.: D'Ans-Lax-Taschenbuch für Physiker und Chemiker, Bd. II, 3. Aufl. Berlin-Göttingen-Heidelberg-New York: Springer 1964.

    Google Scholar 

  • Mackenzie, A. P., Luyet, B. J.: Freeze-drying and protein denaturation in muscle tissue; losses in protein solubility. Nature (Lond.) 215, 83–84 (1967).

    Google Scholar 

  • McAlear, J., Hoyle, G., Selverston, A.: The phenomenon of A band contraction, an artifact of preparation. J. Cell Biol. 23, ASCB Abstracts 57A (1964).

  • Menz, L. J., Luyet, B. J.: An electron microscope study on the distribution of ice in single muscle fibers frozen rapidly. Biodynamica 8, 261–294 (1961).

    Google Scholar 

  • Mommaerts, W. F. H. M., Shilling, M. O.: The rapid freezing method for the interruption of muscular contraction. Rapid mixing and sampling techniques in biochemistry, p. 239–254. New York: Academic Press 1964.

    Google Scholar 

  • Muralt, A. v.: Die Signalübermittlung im Nerven. Basel: Birkhäuser 1946.

    Google Scholar 

  • Osborne, M. P.: Supercontraction in the muscles of the blowfly larva: an ultrastructural study. J. Insect Physiol. 13, 511–554 (1967).

    Google Scholar 

  • Page, S. G.: A comparison of the fine structures of frog slow and twitch muscle fibers. J. Cell Biol. 26, 477–497 (1965).

    Google Scholar 

  • Pease, D. C.: Eutectic ethylene glycol and pure propylene glycol as substituting media for the dehydration of frozen tissue. J. Ultrastruct. Res. 21, 75–97 (1967a).

    Google Scholar 

  • — The preservation of tissue fine structure during rapid freezing. J. Ultrastruct. Res. 21, 98–124 (1967b).

    Google Scholar 

  • — Structural features of unfixed mammalian smooth and striated muscle prepared by glycol dehydration. J. Ultrastruct. Res. 23, 280–303 (1968).

    Google Scholar 

  • Phillips, J. E.: Rectal absorption in the desert locust Schistocerca gregaria. I. Water. J. exp. Biol. 41, 15–38 (1964).

    Google Scholar 

  • Rebhun, L. I.: The use of freeze-substitution in the interpretation of ultrastructure. Advances in freeze-drying / Lyophilisation, p. 133–146. Paris 1966.

  • Reedy, M. K.: Ultrastructure of insect flight muscle. I. Screw sense and structural grouping in the rigor cross-bridge lattice. J. molec. Biol. 31, 155–176 (1968).

    Google Scholar 

  • — Holmes, K. C., Tregear, R. T.: Induced changes in orientation of the cross-bridges of glycerinated insect flight muscle. Nature (Lond.) 207, 1276–1280 (1965).

    Google Scholar 

  • Reynolds, E. S.: The use of lead citrate at high pH as an electron-opaque stain in electron microscopy. J. Cell Biol. 17, 208–212 (1963).

    Google Scholar 

  • Rollett, A.: Untersuchungen über die Contraction und Doppelbrechung der quergestreiften Muskelfasern. Denkschr. Kais. Akad. Wiss., Math.-Nat. Klasse 58, 41–98 (1891).

    Google Scholar 

  • Rzepka, I.: (Die Muskelkontraktion. Realschullehrerarbeit), unveröffentlicht.

  • Schlote, F.-W.: Zellforschung mit Elektronenmikroskop und Mikromanipulator. Leitz-Mitt. Wiss. Techn. 1, 42–46 (1959).

    Google Scholar 

  • — Die dicken Myofilamente der glatten Muskelfasern von Helix pomatia. Z. Zellforsch. 92, 503–508 (1968).

    Google Scholar 

  • Smith, D. S.: The organization of flight muscle fibers in Odonata. J. Cell Biol. 28, 109–126 (1966a).

    Google Scholar 

  • — The structure of intersegmental muscle fibers in an insect, Periplaneta americana L. J. Cell Biol. 29, 449–459 (1966b).

    Google Scholar 

  • Sokal, R. R., Rohlf, F. J.: Biometry. San Francisco 1969.

  • Spurr, A. R.: A low-viscosity epoxy resin embedding medium for electron microscopy. J. Ultrastruct. Res. 26, 31–43 (1969).

    Google Scholar 

  • Stephens, R. E.: Anomalous contraction of invertebrate striated muscle. J. Cell Biol. 27, 639–649 (1965).

    Google Scholar 

  • Toselli, P. A., Pepe, F. A.: The fine structure of the ventral intersegmental abdominal muscles of the insect Rhodnius prolixus during the molting cycle. I. Muscle structure at molting. J. Cell Biol. 37, 445–461 (1968).

    Google Scholar 

  • Trump, B. E., Goldblatt, P., Griffin, C., Waravdekar, V. S., Stowell, R. E.: Effects of freezing and thawing on the ultrastructure of mouse hepatic parenchymal cells. Lab. Invest. 13, 967–1002 (1964).

    Google Scholar 

  • Usherwood, P. N. R., Grundfest, H.: Peripheral inhibition in skeletal muscle of insects. J. Neurophysiol. 28, 497–518 (1965).

    Google Scholar 

  • Villafranca, G. W. de: The A and I band length in stretched or contracted horseshoe crab skeletal muscle. J. Ultrastruct. Res. 5, 109–115 (1961).

    Google Scholar 

  • — Marschhaus, C. E.: Contraction of the A band. J. Ultrastruct. Res. 9, 156–166 (1963).

    Google Scholar 

  • — Philpott, D. E.: The ultrastructure of striated muscle from Limulus polyphemus. J. Ultrastruct. Res. 5, 151–165 (1961).

    Google Scholar 

  • Weber, E.: Grundriß der biologischen Statistik. 6. Auf. Stuttgart: Fischer 1967.

    Google Scholar 

  • Weber, H.: Grundriß der Insektenkunde. 4. Aufl. Stuttgart: Fischer 1966.

    Google Scholar 

Download references

Author information

Authors and Affiliations

Authors

Additional information

Auszug aus der Dissertationsarbeit „Elektronenmikroskopische Untersuchungen der Muskulatur des ventralen Diaphragmas von Locusta migratoria und der langsamen Kontraktionswelle unter Anwendung der Gefriersubstitution“ (Mathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultät der Universität Göttingen). Auf Anregung von Herrn Prof. Dr. Schlote und mit Unterstützung durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft und die Göttinger Akademie der Wissenschaften.

Rights and permissions

Reprints and permissions

About this article

Cite this article

Dierichs, R. Elektronenmikroskopische Untersuchungen des ventralen Diaphragmas von Locusta migratoria und der langsamen Kontraktionswelle nach Fixation durch Gefriersubstitution. Z.Zellforsch 126, 402–420 (1972). https://doi.org/10.1007/BF00306853

Download citation

  • Received:

  • Issue Date:

  • DOI: https://doi.org/10.1007/BF00306853

Key words

Navigation