Über Substrate und Reaktionsprodukte der kininbildenden Enzyme Trypsin, Serum- und Pankreaskallikrein sowie von Crotalusgift

Zusammenfassung

Nach erschöpfender Umsetzung von Kininogen mit kininfreilegenden Enzymen wurden die Spaltungsansätze durch Kombination chromatographischer und pharmakologischer Methodik analysiert. Pankreaskallikrein entwickelte nur Kinin-10, Serumkallikrein und Crotalus adamanteus-Gift nur Kinin-9. Das Trypsinpräparat bildete ganz überwiegend Kinin-9, daneben aber etwas Kinin-10. Erschöpfende Vorbehandlung von Kininogen mit Trypsin oder Schlangengiftenzym machte eine nachfolgende Freilegung von Kinin-10 durch Pankreaskallikrein unmöglich; doch sind, wie umgekehrtes Vorgehen zeigt, ca. 10% des säurebehandelten Kininogens gegen Pankreaskallikrein resistent.

Trypsin, Serumkallikrein und Crotalusgift bilden Kinin-9 aus Kinin-11 wesentlich leichter als aus Kinin-10, aber schwerer als aus Kininogen. Crotalusgift hat eine relativ größere Affinität zu Kinin-11 als die übrigen Enzyme. Weder Kinin-11 noch Kinin-10 können aus kinetischen Gründen in den Hauptweg der Kinin-9-Bildung eingeschaltet sein; Kinin-11 ist auch kein erhebliches Intermediärprodukt der Kinin-10-Bildung.

Fehlerquellen des Verfahrens und Wege zu ihrer Elimination werden aufgezeigt.

Summary

Kininogen has been treated exhaustively with kinin releasing enzymes, followed by combined chromatographic and pharmacological analysis of the reaction products. Pancreatic kallikrein releases kinin-10 only, serum kallikrein and crotalus adamanteus venom kinin-9 only. The trypsin preparation forms mainly kinin-9 and a few percent of kinin-10.

Exhaustive pretreatment of kininogen with trypsin or snake venom prevents the secondary release of kinin-10 by pancreatic kallikrein; reversal of the procedure indicates a kallikrein-resistant 10% part of the kininogen.

Trypsin, serum kallikrein and crotalus venom produce kinin-9 from kinin-11 much more easily than from kinin-10, but less easily than from kininogen; crotalus venom has, however, a relatively higher affinity to kinin-11 than the other enzymes mentioned. From kinetic reasons neither kinin-11 nor kinin-10 can be involved in the main pathway of formation of kinin-9; furthermore kinin-11 is no major intermediary product of kinin-10 formation.

Sources of error in handling and determining minute amounts of kinins and their elimination are described.