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Herstellung rekombinanter β2-adrenerger Rezeptoren

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Part of the book series: Ersatz- und Ergänzungsmethoden zu Tierversuchen ((TIERVERSUCHE))

Zusammenfassung

Der β2-adrenerge Rezeptor gehört zur großen Familie der G Protein-gekoppelten Rezeptoren. Aufgrund der pharmakologischen Bedeutung dieses Rezeptors und seiner Funktion als Prototyp für diese Familie von Rezeptoren wurden verschiedene Expressionssysteme getestet, um den funktionellen menschlichen Rezeptor zu erhalten. Geringe Bedeutung für pharmakologische Studien erreichten dabei prokaryontische Systeme oder die Expression in niederen Eukaryonten. Zelluläre Systeme höherer Eukaryonten sind dagegen in der Lage, größere Mengen funktionellen Rezeptors zu produzieren. Ein sehr schnell verfügbares System zur transienten Expression stellen COS Zellen dar. CHO Zellen eignen sich für die stabile Expression und zeigten die bisher höchste Expression des β2-adrenergen Rezeptors. Mit Hilfe des Bakulovirussystems konnten große Mengen von β2-adrenergen Rezeptoren in Insektenzellen exprimiert werden. Diese Mengen reichen zur Reinigung und Rekonstitution der Rezeptoren. Für alle drei Systeme konnte die volle Funktion des β2-adrenergen Rezeptors gezeigt werden.

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Literatur

  • Collins S., Caron M.G., Lefkowitz R.J., From ligand binding to gene expression: New insights into the regulation of G protein-coupled receptors, Trends Biochem. Sci. 17, 37–39, 1992.

    Article  PubMed  CAS  Google Scholar 

  • Dixon R.A.F., Kobilka B.K., Strader D.J., Benovic J.L., Dohlman H.G., Frielle T., Bolanowski M.A., Bennett CD., Rands E., Diehl R.E., Momford R.A., Slater E.E., Sigal E.S., Caron M.G., Lefkowitz RJ., Strader CD., Cloning of the gene and cDNA for mammalian ß-adrenergic receptor and homology with rhodopsin, Nature 321, 75–79, 1986.

    Article  PubMed  CAS  Google Scholar 

  • George S.T., Arbabian M.A., Ruoho A.E., Kiely J., Malbon C.C, High-efficiency expression of mammalian ß2-adrenergic receptors in baculovirus-infected insect cells, Biochem. Biophys. Res. Com-mun. 163, 1265–1269, 1989.

    Article  CAS  Google Scholar 

  • King K., Dohlman H.G., Thorner J., Caron M.G., Lefkowitz R.J., Control of yeast mating signal transduction by a mammalian ß2-adrenergic receptor and Gs α subunit, Science 250, 121-123.

    Google Scholar 

  • Kobilka B., Adrenergic receptors as models for G protein-coupled receptors, Ann. Rev. Neurosci. 15, 87–114, 1992.

    Article  PubMed  CAS  Google Scholar 

  • Kobilka B.K., Dixon R.A.F., Frielle T., Dohlmann H.G., Bolanowski M.A., Sigal I.S., Yang-Feng T.L., Francke U., Caron M.G., Lefkowitz R.J., cDNA for the human ß2-adrenergic re ceptor: a protein with multiple membrane-spanning domains and a chromosomal location shared with the PDGF receptor gene, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84, 46–50, 1987.

    Article  PubMed  CAS  Google Scholar 

  • Lohse M.J., Stable overexpression of human ß2-adrenergic receptors in mammalian cells, NaunynSchmiedeberg’s Arch. Pharmacol. 345, 444–450, 1992.

    CAS  Google Scholar 

  • Marullo S., Delavier-Klutchko C, Guillet J.-G., Charbit A., Strosberg A.D., Emorine L.J., Expression of human ß1 and ß2-adrenergic receptors in E. choli as a new tool for ligand scree ning, Bio/Technology 7, 923–927, 1989.

    Article  CAS  Google Scholar 

  • Michel M.C., ß-Adrenergic receptors, in: Doods H.N., van Meel J.C.A. (eds.), Receptor data for biological experiments: A guide to drug selectivity, New York: Ellis Horwood, 19–22, 1991.

    Google Scholar 

  • Raymond J.R., Hnatowich M., Lefkowitz RJ., Caron M.G., Adrenergic receptors, models for regulation of signal transduction processes, Hypertension 15, 119–131, 1990.

    Article  PubMed  CAS  Google Scholar 

  • Reiländer H., Boege F., Vasudevan S., Maul G., Hekman M., Dees C, Hampe W., Helmreich E.J.M., Michel H., Purification and functional characterization of the ß2-adrenergic receptor pro duced in baculovirus-infected insect cells, FEBS Lett. 282, 441–444, 1991.

    Article  PubMed  Google Scholar 

  • Wang H.-Y., Berrios M., Hadcock J.R., Malbon C.C., The biology of ß-adrenergic receptors: analysis in human epidermoid carcinoma A431 cells, Int. J. Biochem. 23, 7–20, 1991.

    Article  PubMed  CAS  Google Scholar 

  • Watson S., Abbott A., TiPS receptor nomenclature supplement, Trends Pharmacol. Sci. 148, 1–35, 1992.

    Google Scholar 

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© 1993 Springer-Verlag Wien

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Söhlemann, P., Lohse, M.J. (1993). Herstellung rekombinanter β2-adrenerger Rezeptoren. In: Schöffl, H., Spielmann, H., Koidl, B., Gruber, FP., Reinhardt, A. (eds) Alternativen zu Tierversuchen in Ausbildung, Qualitätskontrolle und Herz-Kreislauf-Forschung. Ersatz- und Ergänzungsmethoden zu Tierversuchen. Springer, Vienna. https://doi.org/10.1007/978-3-7091-9307-5_31

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  • Publisher Name: Springer, Vienna

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