Zusammenfassung
Ziel
Untersuchungen zur Auswirkung von Zeit, Temperatur und Lichtexposition auf Ranibizumab (Lucentis®, Genentech, San Francisco, USA) in Kunststoffspritzen.
Methode
Die Ranibizumab-Lösung wurde aus den Originalbehältern in Kunstoffspritzen aufgezogen, verschlossen und nach unterschiedlichen Aufbewahrungszeiten unter verschiedenen Temperatur- (4 °C vs. Raumtemperatur) und Lichtbedingungen (lichtgeschützt vs. lichtexponiert) untersucht. Analysiert wurden pH-Wert sowie Proteinkonzentration und -stabilität. Die Bindungsaffinität zu VEGF-165 wurde mittels ELISA („enzyme-linked immunosorbent assay“) überprüft. Weiterhin wurden frisch entnommene Originalproben mit der Wirkstofflösung aus handelsüblichen Fertigspritzen, die bis zu 14 Tage aufbewahrt wurden, verglichen.
Ergebnisse
Der pH-Wert blieb unter den beschriebenen Bedingungen stabil. Die Proteinbanden in der SDS-PAGE-Gel-Elektrophorese und die Messung der Proteinkonzentration wiesen eine zeitbedingte leichte Abnahme auf. Raumtemperatur und Lichtexposition hatten keinen zusätzlichen Einfluss. Die Bindungsaffinität von Ranibizumab in Kunststoffspritzen nahm innerhalb eines Tages signifikant ab und wies auch in den Folgetagen eine progrediente und signifikante (p<0,05) Abnahme auf. Der gleiche Effekt konnte in handelsüblichen Fertigspritzen festgestellt werden. Dieser Prozess verstärkte sich, wenn die Spritzen nicht sachgerecht aufbewahrt und Licht und Raumtemperatur ausgesetzt wurden.
Schlussfolgerung
Die Entscheidung, das Originalprodukt oder ausgeeinzeltes Ranibizumab zu verwenden, wurde bisher von unterschiedlichen sozioökönomischen und rechtlichen Aspekten beeinflusst. Ein neuer, nicht zu vernachlässigender Aspekt ist der Einfluss der Aufbewahrung der Wirkstofflösung in Kunstoffspritzen auf die Qualität und biologische Wirksamkeit des Antikörperfragments.
Abstract
Objective
The aim of this study was to determine the influence of time, temperature and light exposure on ranibizumab (Genentech, San Francisco, USA) in plastic syringes.
Methods
Samples of ranibizumab were drawn from the original vials into plastic tuberculin syringes, capped and analyzed after different storage intervals under varying temperature conditions (4 °C and room temperature) and light exposure (protected and room light). The samples were tested for the pH value, protein stability and concentration as well as for the binding affinity to VEGF-165 in an ELISA (enzyme linked immunoassay). Additionally, original freshly drawn samples were compared to commercially available ready to use ranibizumab syringes analyzed up to 14 days after sampling.
Results
Samples stored under the described conditions retained a stable pH. Both SDS-PAGE analysis as well as protein concentration measurements shows slightly decreasing values over time that were not additionally influenced by light exposure or room temperature. The binding affinity to VEGF-165, however, was significantly decreased (p<0.05) over time starting from the first day after sampling. A similar effect could be observed in commercially available ready to use syringes. Exposure to light and room temperature led to additional decreases in the binding affinity to VEGF-165.
Conclusion
Until now different socioeconomic and legal aspects have influenced the choice whether to use original vials or pre-sampled ranibizumab. A new aspect is the effect of storage in plastic syringes on the quality and biological efficacy of the antibody fragment.
Literatur
Boyer DS, Antoszyk AN et al; MARINA Study Group (2007) Subgroup analysis of the MARINA study of ranibizumab in neovasculqar age-related macular degeneration. Ophthalmology 114:246–252
Kaiser PK, Brown DM, Zhang K et al (2007) Ranibizumab for predominantly classic neovascular age-related macular degeneration: subgroup analysis of first-year ANCHOR results. Am J Ophthalmol 144:850–857
Wolf A, Gandorfer A, Haritoglou C et al (2009) Volumenberechnungen zur aktuellen intravirealen Injektion von Lucentis. Ophthalmologe 107:435–438
Kahook MY, Liu L, Ruzycki P et al (2010) High-molecular weight aggregates in repackaged bevacizumab. Retina 30:887–892
Peters S, Julien S, Heiduschka P et al (2007) Antipermeability and antiproliferative effects of standard and frozen bevacizumab on choroidal endothelial cells. Br J Ophthalmol 91:827–831
Bakri SJ, Snyder MR, Pulido JS et al (2006) Six-month stability of bevacizumab (Avastin) binding to vascular endothelial growth factor after withdrawal into a syringe and refrigeration or freezing. Retina 26:519–522
Chen YH, Wu PC, Shiea J et al (2009) Evaluation of the sterility, stability and efficacy of bevacizumab stored in multiple-dose vials for 6 months. J Ocul Pharmacol Ther 25:65–69
Gerding H, Timmermann M (2010) Accuracy and precision of intravitreally injected ranibizumab doses: an experimental study. Klin Monbl Augenheilkd 227:269–272
Interessenkonflikt
Die Untersuchungen wurden im Rahmen eines unabhängigen Investigator Initiated Trial mit Unterstützung der Firma Novartis durchgeführt.
Author information
Authors and Affiliations
Corresponding author
Rights and permissions
About this article
Cite this article
Grisanti, S., Tura, A. Qualitätsunterschiede zwischen Ranibizumab aus Originalbehältern und aus Fertigspritzen. Ophthalmologe 107, 1123–1132 (2010). https://doi.org/10.1007/s00347-010-2299-0
Published:
Issue Date:
DOI: https://doi.org/10.1007/s00347-010-2299-0