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In-vivo-Darstellung des Bindehautepithels

Eine vergleichende morphologische Untersuchung mittels konfokaler Laser-Scanning-Mikroskopie und Impressionszytologie

In vivo imaging of the conjunctival epithelium using confocal laser scanning microscopy

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Zusammenfassung

Hintergrund

Die zytomorphologische Beurteilung des Oberflächenepithels der Konjunktiva ist bei verschiedenen Augenerkrankungen ein wesentlicher Bestandteil der klinischen Stufendiagnostik. Voraussetzung dafür ist bislang die minimal-invasive Materialentnahme und labortechnische Probenaufbereitung. Für eine zeitnahe direkte In-vivo-Darstellung kornealer Strukturen wird seit geraumer Zeit die konfokale Laser-Scanning-Mikroskopie mit dem Rostocker Laser-Scanning-Mikroskop (RLSM) erfolgreich eingesetzt. Mit einer vergleichenden Untersuchung des normalen Bindehautepithels zwischen der Lichtmikroskopie und der konfokalen RLSM sollen wesentliche Vorraussetzungen für eine In-vivo-Evaluierung des konjunktivalen Epithels geschaffen werden.

Material und Methode

Für den intraindividuellen Vergleich wurden 110 impressionszytologische Flächenpräparate von 23 augengesunden Probanden analysiert. Die vergleichende Mustererkennung erfolgte nach Herstellung eines flächenhaften, direkten Kontaktes zwischen der Augenoberfläche und der planen Vorderfläche des RLSM.

Ergebnisse

Anhand der Verteilung der Reflektoren (helle Bildpunkte) lassen sich bereits in der In-vivo-Diagnostik wichtige morphologische Strukturen des Epithels (Zellkern, Zytoplasma, Kern-Plasma-Relation) differenzieren. Anhand von Form und Größe sind sekretorische Zellen mit dem RLSM zu erfassen. Hochreflektive, helle Bildpunkte stellen kontrastreich die Zellwandung der Becherzellen bzw. breite Intrazellularräume dar.

Schlussfolgerung

Mit dem RLSM gelingt die In-vivo-Untersuchung wesentlicher anatomisch-morphologischer Strukturen des Bindehautepithels. Im Hell-Dunkel-Erkennungsmuster der Becherzellen imponieren Unterschiede, welche auf die Sekretzusammensetzung oder den Funktionszustand (Hypo- oder Hypersekretion) Hinweise geben könnten.

Abstract

Background

In various ocular diseases, cytomorphological findings of the ocular surface are an essential component of clinical diagnostics. When evaluating the conjunctival epithelium, minimally invasive acquisition of biomaterial is necessary for lab and technical processing and in vitro histological examination. To examine corneal structures in vivo, confocal laser scanning microscopy is a successful standard method. Our aim was to employ in vivo confocal laser scanning microscopy also for examining the conjunctival epithelium.

Material and method

Results were analyzed and compared with cytomorphological findings of impression cytology. Accordingly, the basic features of conjunctival in vivo examination using RLSM were described and defined. In vivo images were analyzed and compared with impression cytological slide preparations (n=110) of 23 healthy test persons. Examination was standardized. Finally, the confocal laser scan images were compared to the impression cytological patterns.

Results

Due to the distribution of reflectors (pixel brightness), diagnostic analysis of important morphological structures (cell nucleus, cytoplasm, nucleus/plasma relation) of the conjunctiva is possible. Secretory cells of the epithelium (goblet cells) can be easily recognized by their size. Highly reflective pixels depict cell walls or wide intercellular spaces with high contrast.

Conclusions

The in vivo investigation of important anatomical and morphological structures of the conjunctival epithelium is possible using RLSM. The distribution pattern of goblet cell pixel brightness may correlate with various secretion contents or suggest distinct, recognizable, functional conditions (hypo- or hypersecretion).

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Rath, R., Stave, J., Guthoff, R. et al. In-vivo-Darstellung des Bindehautepithels. Ophthalmologe 103, 401–405 (2006). https://doi.org/10.1007/s00347-006-1337-4

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