Standardisierte AgNOR-Färbemethode für formalinfixiertes und paraffineingebettetes Material

Zusammenfassung

In dieser Studie wird eine Methode zum Nachweis von sog. argyrophilen Nukleolus Organisator Regionen assoziierten Proteinen (AgNORs) vorgestellt, die es erstmalig erlaubt, diese als Teilstrukturen des Nukleolus an formalinfixiertem und paraffineingebetteten Gewebe zu erkennen. Mit einer Vorbehandlung durch feuchte Autoklavierung werden am archivierten Material Färbeergebnisse erzielt, wie sie an alkoholfixiertem Frischmaterial erreicht wurden. Sämtliche Färbeartefakte entfallen mit dieser neuen Methode. Weitere Vorteile bieten die einfache Handhabung sowie die Tatsache, daß auch bei unterschiedlicher Fixations- und Einbettungsdauer standardisierte und somit vergleichbare Ergebnisse erzielt werden. Das vorgestellte Verfahren bietet somit die Möglichkeit, die Wertigkeit der AgNOR-Quantifizierung auch an archiviertem Paraffinmaterial in retrospektiven Studien reproduzierbar zu evaluieren.

Summary

Visualization of proteins associated with nucleolar organizer regions proteins (AgNORs) on formalin-fixed and paraffin-embedded archival tissues is substantially improved after application of wet autoclave pretreatment. Silver staining results are comparable to those obtained on tissues processed in alcoholbased fixatives, illustrating AgNORs as substructures of the nucleoli without any staining artefacts. A highly reproducible staining quality was achieved irrespective of tissue origin or duration of formalin fixation. As a result of this novel and simple method, the grounds have been prepared for standardized AgNOR quantification on archival material.