Nachweis Shigatoxin-bildender / Enterohämorrhagischer Escherichia coli (STEC / EHEC) mittels Real-Time PCR

Zusammenfassung:

Enterohämorraghische Escherichia coli (EHEC) zählen in Deutschland zu einer der bedeutendsten Ursachen bakterieller gastrointestinaler Lebensmittelinfektionen. Aufgrund der Möglichkeit des Auftretens postinfektiöser Syndrome, die vor allem bei Kleinkindern zu schweren organischen Schäden bis hin zum Tod führen können und der sehr geringen Infektionsdosis, darf der Erreger in 25 g verzehrsfertigem Lebensmittel nicht nachweisbar sein.

Die gemäß der Amtlichen Sammlung nach § 64 Lebensmittel- und Futtermittelgesetzbuch (LFGB) vorgeschriebene PCRMethode und ein Real-Time-PCR-Verfahren wurden miteinander zuerst für den Nachweis isolierter DNA und danach mit Routineproben aus der human- bzw. veterinärmedizinischen sowie aus der Wasser- bzw. Lebensmitteldiagnostik verglichen.

Das Real-Time-PCR-Verfahren zeichnete sich in beiden Untersuchungen durch eine höhere Sensitivität aus; allerdings konnte der für eine lebensmittelrechtliche Beurteilung notwendige kulturelle Keimnachweis nicht bei allen in der Real-Time-PCR positiven Proben geführt werden.

Abstract:

Enterohaemorrhagic Escherichia coli (EHEC) are among the most important bacterial causes of food-borne gastrointestinal infections in Germany. Because of the occurrence of post-infectious syndromes leading to severe organic damages and even death particularly among children, and with respect to the very low infection dose, EHEC may not be present in 25 g of consumable food.

In this study, the PCR method enlisted in the Official Collection of Methods established pursuant to Article 64 of the German Food and Feed Law (Lebensmittel- und Futtergesetzbuch, LFGB) and a real-time PCR procedure were compared regarding their diagnostic outcome using both isolated DNA and routine samples samples (sent in for human and/or veterinary microbiological diagnostics as well as for environmental water and/or food diagnostics).

The real-time PCR procedure showed a higher sensitivity in both diagnostic settings. A positive result by bacterial culture, however, which is needed for an assessement according to the Food and Feed Law regulations was not achieved in all real time- PCR positive probes.