Dynamika mnoźenia vírusu chrípky v tkanivových kultúrach v otáčavých skúmavkách

Súhrn

Sledovali sme dynamiku rozmnozovania vírusov chrípky v tkanivových. kultúrach v otáčavých skúmavkách. Pokusy sme robili s vírusom chrípky A, kmeňom PR 8 a kmeňom A₁ Čs 1-1951. Tkanivové kultúry sme zakladali z chorionalantoickej blany a zmiešaných tkanív z celého kuracieho embrya.

Po adsorbcii a vnútrobunkovom rozmnozovaní vírusu pozorujeme prvé uvol’ňovanie vírusových častíc do tekutého prostredia kultúr medzi 4. a 8. hod. inkubácie, niekedy aj o niečo neskoršie. Infekčné titre sa nepretrzite zvyšujú a dosiahnu maxima uz po 24 hod. alebo po 48 hod. inkubácie. Rozmnozovanie kmeňaA ₁ Čs 1 - 1951 je menej pravidelné ako rozmnozovanie laboratórneho kmeňa PR 8.

V prítomnosti kuracieho embryonálneho extraktu a konského séra vo výzivnej tekutine kultúr zo zmiešaných tkanív z celého kuracieho embrya prevýši mnozstvo uvol’neného vírusu az po 16–20 hod. inkubácie mnozstvo pridaného vírusu ku kultúram.

Prvé hemaglutininy v tekutom prostredí kultúr sme dokázali u kmeňa PR 8 najskorej po 20 hod., ale vo väčšine pokusov ešte neskoršie. Rozmnozovanie kmeňa A₁ Čs 1 - 1951 v tkanivových kultúrach v otáčavých skúmavkách sme pomocouhemaglutinačnej skúšky nedokázali.

Zistili sme, ze mnozstvo vírusu y rozmnozovacích tkanivových kultúrach sa dá titrovat’ v titračných tkanivových kultúrach z chorionalantoickej blany, pestovanych v otáčavých skúmavkách, čo má význam pre laboratórnu prax, lebo sa tým uš etrí mnoho materiálu.

Резюме

Авторы исследовали д инамику размножения вируса гриппа в тканевых кул ьтурах во вращающихс я пробирках. Опыты прои зводились с вирусом г риппа типа А, штамм PR 8 и штамм А₁ Čs. 1–1951. Основой тканевых культур служили хорионаллантоисные оболочки и смешанные ткани всего куриного зародыша. После адсор бции и внутриклеточного ра змножения вируса первые признаки выде ления вирусных части ц в жидкую культивационную сре ду наблюдаются между 4-ым и 8-ым часом ин кубации, а иногда и нес колько позднее. Инфекционны е титры непрерывно повышают ся и достигают максим ума через 24–48 час. инкубации. Размно жение штамма a₁ Čs. 1–1951 отличает ся меньшей правильно стью, чем размножение лаборат орного штамма PR 8. В присутстви и в питательной среде куриного эмбрионального экст ракта и лошадиной сыворотки в культура х из смешанных тканей всего куриного зародыша ко личество выделяемого вируса п ревышает количество вируса, прибавленного к куль туре, только через 16–20 часов инкубации. На личие гемагглютинин ов в питательной среде ку льтур штамма PR 8 мы впервые устанавли вали после 20-часовой ин кубации, а в большинстве случа в е ще позднее. Размножение штамма А₁ Čs. 1–1951 в тканевых культ урах во вращающихся пробирк ах не было нами с помощью реакци и гемагглютинации до казано. Авторы установили, чт о титрация количеств а вируса в тканевых кул ьтурах, служащих для е го размножения, возможн а в культурах хорионаллантоисных оболочек во вращающи хся пробирках, — что имеет значение для лаборат орной практики ввиду значи тельной экономии мат ериала.

Summary

The dynamics of reproduction of the influenza virus were observed by the authors in tissue cultures in roller tubes. The experiments were performed with the influenza virus type A, strain PR 8 and strain A₁ Čs 1 - 1951. Tissue cultures from the chorio-allantoic membrane and mixed tissues of the whole chicken embryo were used. Following adsorption and intracellular proliferation of the virus, the first liberation of virus particles into the liquid phase of the cultures may be observed after 4–8 hours of incubation, sometimes a little later. The infection titres continuously increase and reach a maximum after 24–48 hours of incubation. The proliferation of the strain A₁ Čs 1 - 1951 is less constant than the proliferation of the laboratory strain PR 8. In the presence of the chick embryo extract and horse serum in the nutritive fluid of cultures from mixed tissues of the whole chicken embryo, the amount of liberated virus surpasses the quantity of virus originally added to the cultures after 16 – 20 hours of incubation at the earliest. The first haemagglutinins were not found to be present in the liquid phase of the cultures until after 20 hours of incubation in the case of strain PR 8, while in most of the other experiments they appeared still later. We did not succeed in demonstrating the proliferation of the strain A₁ Čs 1 - 1951 in tissue cultures in roller tubes with the aid of the haemagglutination test. It was found that it is possible to titrate the amounts of the virus in these proliferating tissue cultures in titration tissue cultures from chorio-allantoic membrane kept in roller tubes. This finding is important for practical laboratory work, since in this way it is possible to save a large amount of material.