Summary
This study was concerned with the course of DNA synthetic activity (3H-TdR-LI-method) in the buccal mucosa of adult male Sprague Dawley rats over an incubation period of 5 h. Interest was focussed on the influences of different media and, in particular, on temporary changes in the proliferative activity.
3H-LI were compared in specimens (a) kept in active (=i.e.,3H-thymidine containing) medium throughout their respective incubation period and (b) pre-incubated in inactive medium for varying, but clearly defined periods before being transferred into active medium for 30 min (actual3H-LI).
Independent of the medium used the rate of DNA synthesis was markedly lowered at 60 min, the reduction being more or less significant in the different media. This was due to a temporary inhibition of DNA synthesis, which was restored after 120–180 min. In contrast, the blockade of G2-phase and/or mitosis persisted up to the end of incubation, as indicated by the unchanged number of labelled mitotic figures after 120 min.
Addition of glutamine to Mc Coy’s 5A markedly enhanced the activity of3H-thymidine incorporation, but could not prevent the temporary inhibition of DNA synthesis. The biochemical mechanisms relevant for cell proliferation have been reviewed and correlated to the present results.
Zusammenfassung
An der Wangenschleimhaut erwachsener männlicher Sprague-Dawley-Ratten wurde die DNS-Synthese-Aktivität (3H-TdR-Index) während einer bis zu 5stündigen Inkubation unter Verwendung verschiedener Medien untersucht. Besonderes Interesse galt dem Einfluß der Medienwahl auf das Proliferationsverhalten und dem zeitlichen Verlauf des3H-Indexes nach längerer Inkubationszeit. Bestimmt wurde3H-Index nach Dauerinkubation im aktiven (=3H-Thymidin-haltigen) Medium, sowie nach unterschiedlich langer Vorinkubation im inaktiven (=3H-Thymidin-freien) Medium mit abschließender 30minütiger Inkubation im aktiven Medium („aktueller3H-Index“).
Inallen Medien war bereits bei 60minütiger Inkubation eine Verminderung der DNS-Syntheserate nachweisbar, mit unterschiedlicher Ausprägung in den verschiedenen Medien. Es handelte sich hierbei um eine temporäre Hemmung der DNS-Syntheseaktivität, die nach 120–180 min wieder aufgehoben war. Dagegen blieb eine nach 2stündiger Inkubation feststellbare Blokkade der G2-und Mitosephase (fehlende Zunahme markierter Mitosefiguren) bis Inkubationsende bestehen.
Glutaminzusatz zum Medium steigerte die Rate der DNS-Synthese deutlich, ohne deren temporäre Hemmung verhindern zu können. Einige an der Regulation der Zeilproliferation beteiligte molekularbiochemische Mechanismen werden im Zusammenhang mit unseren Untersuchungsergebnissen diskutiert.
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Hornstein, O.P., Heckel, A. & Schell, H. An autoradiographic analysis of the mode of proliferation in the buccal mucosa of rats incubated up to 5 hours. Virchows Archiv B Cell Pathol 31, 57–66 (1979). https://doi.org/10.1007/BF02889923
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