Dünnschicht-chromatographische Probleme bei der Cortisolbestimmung mittels Proteinbindungstechnik

Summary

In the present study we show different solvent systems which can be used for the separation of cortisol and synthetic cortico-steroids by thin-layer chromatography. For each system Rf values are given; the separation is done without saturation of the chamber. Problems, such as high blanks, or decomposition of cortico-steroids by impurities in the solvents are discussed and also the decomposition of some of the cortico-steroids by UV. The cross reaction of synthetic cortico-steroids with cortisol by a competitive protein binding method using human plasma is demonstrated and it is obvious that even substances with a low cross reactivity might be separated before cortisol is detected, to be sure that true values are obtained.

Zusammenfassung

In der vorliegenden Arbeit werden eine Reihe von Lösungsmittelsystemen vorgestellt und die Möglichkeiten, verschiedene synthetische Steroide dünnschicht-chromatographisch zu trennen. Es werden Probleme, hervorgerufen durch Verunreinigungen der Lösungsmittel und die daraus resultierenden hohen Blanks bei der Proteinbindungsreaktion zur Cortisolbestimmung, besprochen sowie Zersetzung von Steroiden, einerseits durch Lösungsmittelverunreinigungen, andererseits durch Bestrahlung hervorgerufen. Für einige synthetische Steroide werden die, bei der Proteinbindungstechnik mit Cortisol auftretenden Kreuzreaktionen aufgezeigt.