Antikörper-Synthese in vitro

Zusammenfasung

In der vorliegenden Arbeit wurde die Bedeutung der informatorischen RNS für die Synthese von immunspezifischen Proteinen untersucht. Bei Stimulierung von Makrophagen durch Antigen kommt es neben der Bildung von AAP zu der Bildung einer von der AAP-Synthese unabhängigen informatorischen RNS. Diese RNS ist innerhalb der Antigenstimulierten Zelle selbst unwirksam; sie bewirkt aber in einer Milzzellenkultur die Synthese von humoralen Antikörpern. Die AAP-Synthese verläuft mithin innerhalb des Antigen-verarbeitenden Makrophagen über eine besondere Messenger-RNS, während die Antikörpersynthese durch ein Zusammenspiel von Antigen-verarbeitenden Makrophagen mit Antikörper-produzierenden Milzzellen zustandekommt. Die Informationsübertragung vom Makrophagen zur Milzzelle erfolgt durch eine besondere informatorische RNS. Die informatorische RNS zur Antikörpersynthese konnte von der AAP-spezifischen Messenger-RNS durch Zentrifugation im Saccharosegradienten getrennt werden. Beide Arten der RNS, die AAP-Messenger-RNS sowie die informatorische RNS für die Antikörperbildung enthalten die vollständige Information für die Synthese von AAP bzw. von humoralen Antikörpern. Beide verhalten sich in zellfreien Systemen wie normale Messenger-RNS; sie bringen hier die Bildung von immunspezifischen Proteinen auch dann in Gang, wenn das System Actinomycin enthält oder mit DNase behandelt wurde. Eine Wirkung von verunreinigendem Antigen ist hiernach auszuschließen. Die Ergebnisse werden den Aussagen der Instruktionstheorie und der Klon-Selektionstheorie gegenübergestellt.

Summary

The in vitro stimulation of mouse macrophage cells by antigenic material (phage receptor particles from E. coli and from S. marcescens) results into the formation of two types of informational RNA. One of them acts as messenger RNA in the same cell and leads to the formation of an antibody-analogue-product (AAP). The other type of RNA is ineffective within its orignating macrophage cell but effective once it is transferred to a culture of normal spleen cells; it initiates the production of true antibody in the spleen cells. Both types of RNA can be separated by a sucrose gradient centrifugation. Both contain complete information for the synthesis of the immunospecific proteins, i.e. they are able to induce the synthesis of AAP or of antibody in a cell free system in the presence of actinomycin or in a cell free system previonsly treated with DNase. This makes it highly improbable that contaminating substances other than RNA are responsible for the initiation of antibody synthesis by the RNA preparations. The experiments are discussed with reference to the actual theories of antibody formation.