Untersuchungen über die Lokalisation von¹⁴C-Bromhexine im Respirationstrakt von Ratten

Abstract

An attempt has been made to close the still existing gap between the known effect of bromhexine and the mode and site of action. For this purpose, morphological investigations were carried out in rats and rabbits after administration of¹⁴C-labelled Bisolvon in a single dose of 10 mg/kg i.v. or i.p. We used a special drying, freezing and contrast technique. The identification of distribution patterns and specific localizations in the tissues of the experimental animals of the labelled material administered runs into difficulties if their compounds in the tissues and their solubility behaviour are not known for certain. However, since these parameters are largely unknown in new compounds to be tested, it must be assumed that they can be dissolved out by the usual methods. In order to satisfy these considerations, we developed a method in which no aqueous phase is passed through. After freezing and drying of the section, subsequent handling is possible even at room temperature. The evaporation of a thin carbon layer is exceptionally important for this, because this allows the marginal rays to be better absorbed and the resolution of the autoradiograph is better. In addition, the otherwise normally high background is drastically reduced. For comparison of localization, electron microscopical investigations were made. From these it could be demonstrated that silver grains were present in the alveoli, especially in the region of the air-tissue boundary, in the niche cells and in the epithelium of the bronchial system. Even if proof of an intra-cellular deposit cannot be obtained with certainty by the technique described, it can still be deduced from the findings. Final clarification of whether bromhexine develops its effect directly or through an intra-cellular transmitter substance is probably only possible with biochemical and cytochemical techniques. From the results of investigations available at present, it is certainly by enzyme pathways.

Zusammenfassung

Es sollte versucht werden, die noch bestehende Lücke zwischen der bekannten Wirkung von Bromhexine und dem Wirkungsmechanismus bzw. Wirkungsort zu schließen. Hierfür wurden an Ratten und Kaninchen nach Gaben von¹⁴C-Bromhexine in einer einmaligen Dosis von 10 mg/kg i.v. oder i.p. morphologische Untersuchungen durchgeführt. Dabei wendeten wir eine spezielle Trocknungs-, Gefrierschnitt- und Bedampfungstechnik an, die im einzelnen beschrieben wird. Als Vergleich für die Lokalisation wurden elektronenmikroskopische Untersuchungen herangezogen. Es konnte dadurch nachgewiesen werden, daß sich in den Alveolen Silberkörnchen, besonders im Bereich der Luft-Gewebegrenze und der Nischenzellen sowie im Epithel des Bronchialsystems, nachweisen lassen. Wenn auch mit der beschriebenen Technik der Beweis einer intrazellulären Ablagerung nicht erbracht werden konnte, so läßt sich diese doch aus den Befunden ableiten. Eine endgültige Klärung, ob Bromhexine direkt oder über eine intrazelluläre Transmittersubstanz seine Wirkung entfaltet, ist wahrscheinlich nur mit bio- bzw. zytochemischen Techniken zu erbringen.