Reaktionen eines Vinylsulfon- und eines Dichlortriazinfarbstoffes mit N_α-Acetyl-aminosäure-methylamiden als Peptidmodelle für Kollagen

Zusammenfassung

N_α-Acetyl-methylamide von Lysin, Hydroxyprolin, Serin, Threonin, Tyrosin, N_α-Acetylderivate von Histidin, Arginin und Asparagin, sowie ein Hydroxylysinlacton und Glycinmethylamid (α-Aminoendgruppenmodell) wurden mit einem monofunktionellen Vinylsulfonfarbstoff (Remazolbrillantblau R) und einem Dichlortriazinfarbstoff in pH-Bereichen von 6–10 bei Temperaturen bis 35° umgesetzt. Die Untersuchung mit diesen Peptidmodellen und Aminosäurederivaten diente zur Bestimmung und Charakterisierung von Reaktivfarbstoff bindenden Aminosäuren in dem Faserprotein Kollagen.

Die Umsetzungen ergaben eine Reaktion des Vinylsulfonfarbstoffes mit den Derivaten von Lysin, Hydroxylysin, Histidin und Glycin. Die Reaktionsbedingungen des Vinylsulfonfarbstoffes mit dem Lysin- und dem Glycinderivat wurden quantitativ erfaßt. Der Dichlortriazinfarbstoff vermag mit den Seitenkettengruppen von Lysin, Hydroxylysin und Tyrosin, ferner mit α-Aminogruppen quantitativ zu reagieren. Reaktionsprodukte mit den N-Acetylmethylamiden von Serin und Hydroxyprolin konnten nachgewiesen werden. Die Seitenkettengruppen der Aminosäuren Arginin, Asparagin und Threonin reagierten mit keinem der Farbstoffe.

Weiterhin wurde die Vinylsulfonbildung des Remazolbrillantblau R durch pH-stat-Titration untersucht.

Summary

The reaction of two monofunctional dyes, a vinylsulfone (Remazolbrillantblue, R, Farbwerke Hoechst) and a dichlorotriazine dye, withN _α-acetylmethylamide of lysine, hydroxyproline, serine, threonine, tyrosine and with N_α-acetyl derivates of histidine, arginine and asparagine as well as with hydroxylysinelactone and glycenemethylamide (α-amino endgroup model) have been studied at pH 6–10 and temperature 35°C. The experiments with these peptide models and amino acid derivates were carried out in order to estimate and characterize the reactive amino acids of collagen.

The vinylsulfone dye reacted with lysine, hydroxylysine, histidine and glycine derivates. The reaction of vinylsulfone dye studied with lysine and glycine derivates were found to be quantitative. The dichlorotriazine dye reacted quantitatively with the side chain functional groups of lysine, tyrosine and the α-amino group of glycinemethylamide. The side functional groups of the derivates of serine, hydroxypyroline and hydroxylysine, however, reacted to little extent. The side chain groups of amino acids arginine, asparagine and threonine failed to react with both the dyes. — Furthermore, the preparation of vinylsulfone from Remazolbrillantblue R was carried out using pH-stat titrameter.