Metabolische und morphologische Untersuchungen an isolierten Glomerula der Rattenniere

Summary

Fractions with 95–98% glomeruli have been obtained from rat kidneys with a sieve method described in detail. 10 different rinsing solutions have been used during isolation and their influence on the ultrastructure of the glomeruli has been controlled electron microscopically.

The podocytes exhibit a strong edema of cytoplasm and nucleus, reaching up to cytolysis, after Krebs-Henseleit-bicarbonate-, Krebs-Ringer-phosphate- and Robinson-solution. After a Krebs-Henseleit-bicarbonate solution with pH 7.9 instead of pH 7.4 most podocytes have been damaged irreversibly. A satisfying ultrastructure resulted after solutions with a higher colloid osmotic pressure or osmotic pressure. The best results have been obtained with Krebs-Henseleit-bicarbonate solution pH 7.4+3% dextran (mol wt 40000), after which about 60% of the podocytes have been calculated to be intact. 40% of the podocytes in this fraction mainly were mechanically damaged.

While endothelium and mesangium show only minor structural aberrations after the different rinsings, thus most podocytes are damaged irreversibly after Krebs-Henseleit-bicarbonate pH 7.9, and on the other hand about 60% may be intact after Krebs-Henseleit-bicarbonate pH 7.4+3% dextran.

Zusammenfassung

Mit einer im Detail angegebenen, mechanisch schonenden Sieb-Methode wurden aus Rattennieren Glomerulumfraktionen mit einem Reinheitsgrad von 95–98% gewonnen. Dabei wurden 10 verschiedene Spülmedien benützt und ihr Einfluß auf die Ultramorphologie der Glomerula elektronenmikroskopisch kontrolliert.

Nach Verwendung einer Krebs-Henseleit-Bicarbonat-Lösung mit einem pH von 7,9 ist mit der irreversiblen Schädigung des überwiegenden Teiles der Podocyten zu rechnen. Elektronenmikroskopisch befriedigende Resultate ließen sich mit einer Krebs-Henseleit-Bicarbonat-Lösung pH 7,4+3% Dextran erzielen, bei der ca. 60% der in der Fraktion enthaltenen Podocyten intakt blieben. Die restlichen 40% Podocyten waren in erster Linie mechanisch zerstört.

Während Endothel- und Mesangiumzellen nach den verschiedenen Spülmedien kaum morphologische Veränderungen aufweisen, können also die Podocyten je nach Spülmedium überwiegend zerstört werden oder zu etwa 60% erhalten bleiben.