Vergleichende Untersuchungen über Methoden der Ammoniumbestimmung im Blut

Summary

• 1. Three different methods for the determination of ammonia in blood are comparised:

• a) Method for the direct colorimetric determination by phenol-hypochloritereaction (Müller-Beissenhirtz andKeller).

• b) Cation exchange method quantitating the ammonia in eluate by the phenolhypochlorite-reaction (Hutchison andLabby).

• c) Enzymatic method by glutamatedehydrogenase-reaction (Schwarz andSchmidt).

In the case of the cation exchange method and the enzymatic method the blood was deproteinized by ultrafiltration.

• 2. The concentration of ammonia in the venous blood of 10 fasting patients without hepatitis disease was determined. Moreover we evaluated 18 patients with chronical hepatitis or cirrhosis of the liver for concentration of blood ammonia fasting as well as after oral provisions of 5 g ammoniumacetate. The determinations by the three methods were performed simultaneously.

• 3. The comparison between the mean values of all determinations didn't demonstrate a statistical difference between the cation exchange method and the enzymatic method. All mean values of the direct colorimetric method reached a statistical higher level than those of both of the other methods. There was no statistical difference between the cation exchange method and the enzymatic method in respect of the mean increase of the values after provisions of ammoniumacetate, but both of the methods differed statistically from the more increasing values of the direct colorimetric determination.

• 4. The cation exchange method shows the highest methodical deviation; in case of the enzymatic method the methodical deviation is low.

• 5. Because of its specifity, sensitivity, low methodical deviation and rapidity the enzymatic method proves the most secure method for the determination of the ammonia concentration in blood.

• 6. Since the values of ammonia concentration measured with the cation exchange method and the enzymatic method are not significant different and since the two methods are based on very different principles, the values are probably corresponding with the real ammonia concentration in blood.

Zusammenfassung

• 1. Drei Methoden zur Bestimmung der Ammoniumkonzentration im Blut wurden vergleichend geprüft:

• a) Die direkte photometrische Bestimmung mit Phenol-Hypochlorit (Müller-Beissenhirtz u.Keller).

• b) Die Isolierung des Ammoniums durch Adsorption an einem Kationenaustauscher und Bestimmung im Eluat mit Phenol-Hypochlorit (Modifikation der Methode nachHutchinson u.Labby).

• c) Die enzymatische Bestimmung mit der Glutamatdehydrogenase-Reaktion (Modifikation der Methode nachSchmidt u.Schwarz).

Die Originalvorschriften wurden gering modifiziert, insbesondere wurde bei den Verfahren b und c das hämolysierte Blut durch Ultrafiltration enteiweißt.

• 2. Bei 10 Personen ohne Anhalt für Lebererkrankungen und bei 18 Kranken mit chronischer Hepatitis oder Lebercirrhose wurde die Ammoniumkonzentration im venösen Nüchternblut mit den drei Methoden gleichzeitig bestimmt. Bei der Gruppe der Leberkranken wurden die Bestimmungen nach peroraler Gabe von 5 g Ammoniumacetat wiederholt.

• 3. Die Ammoniumbestimmung mit der direkt photometrischen Methode ergibt in allen drei Untersuchungsgruppen (Gesunde, Leberkranke, Leberkranke mit Ammoniumacetatbelastung) eine signifikant höhere mittlere Ammoniumkonzentration als bei Bestimmung mit den beiden anderen Verfahren. Auch die Differenz der Ammoniumkonzentration vor und nach Belastung mit Ammoniumacetat ist bei Bestimmung mit der direkt photometrischen Methode signifikant größer als mit den anderen Methoden. Adsorptionsmethode und enzymatische Methode ergeben keine signifikanten Unterschiede der Ammoniumkonzentration in den einzelnen Untersuchungsgruppen. Auch die mit den beiden Verfahren gemessene Zunahme der Ammoniumkonzentration nach Ammoniumacetatbelastung ist nicht signifikant different.

• 4. Die methodische Streuung ist bei der Adsorptionsmethode am größten, bei der enzymatischen Methode am geringsten. Bei allen drei Verfahren werden dem Plasma zugesetzte Ammoniumionen quantitativ wiedergefunden.

• 5. Wegen ihrer Spezifität, der hohen Empfindlichkeit, der geringen methodischen Streuung und der kurzen Analysendauer ist die enzymatische Bestimmungsmethode in Verbindung mit der Enteiweißung durch Ultrafiltration das Verfahren der Wahl für die Ammoniumbestimmung im Blut.

• 6. Da zwei auf völlig verschiedenen Prinzipien beruhende Bestimmungsverfahren — Adsorptionsmethode und enzymatische Methode — nicht signifikant verschiedene Werte der Ammoniumkonzentration im Blut ergeben, wird durch diese beiden Methoden mit hoher Wahrscheinlichkeit die tatsächliche Ammoniumkonzentration im Blut erfaßt.