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, Volume 62, Issue 1, pp 22–38 | Cite as

Die quantitative Auswertung dünnschichtchromatographisch getrennter Auxine imAvena-Tageslichttest nach Söding (Avena-Silicagel-Krümmungstest)

  • Harald Kaldewey
  • Egon Stahl
Article

Zusammenfassung

  1. 1.

    DerAvena-Silicagel-Krümmungstest stellt eine Modifikation desAvena-Tageslichttests nachSöding dar. Die Übertragung des zu prüfenden Wuchsstoffes auf Agarblocks erfolgt durch Kieselgel, das nach der Dünnschicht-Chromatographie (DC) aus den zu testenden Chromatogramm-Zonen ausgeschabt und über die Agarblocks geschichtet wird. Für die Kontrollen werden abgegrenzte Felder einer Kieselgel-Schicht (über Blutzucker-Pipetten) mit methanolischer Wuchsstoff-Lösung versetzt, ausgeschabt und auf Agar übertragen. Die Agarblocks werden mit dem anhaftenden Kieselgel zum Test benutzt (S. 24).

     
  2. 2.

    IES ist — selbst bei ungleichmäßiger Verteilung in dem Kieselgel-Feld — nach 1/2–1stündigem Aufenthalt der Agarblocks in feuchter Kammer gleichmäßig im Agar verteilt (S. 25f.).

     
  3. 3.

    Testzeiten zwischen 1,5 und 2,5 Std ergaben die beste quantitative Trennung für IES-Konzentrationen zwischen 8×10−8 und 4×10−7 in den Agarblocks, d.h. 8–40 ng Ausgangsmenge (S. 26f.).

     
  4. 4.

    IES läßt sich nach DC praktisch verlustfrei auf Agarblocks übertragen (S. 30f.).

     
  5. 5.

    Bei Benutzung von Kieselgel HF254-Schichten kann die Laufhöhe der zu testenden Substanz unter kurzwelligem UV-Licht ohne Sprühreagens an Hand der auftretenden Fluorescenzlöschung genau markiert werden. 0,5 μg IES sind sicher zu erkennen. Längerer Aufenthalt der Chromatogramme unter UV-Licht ist zu vermeiden. 5 min Bestrahlung mit kurzwelligem UV-Licht bedingt etwa 10% Verlust, anschließende 5 min-Bestrahlung mit langwelligem UV-Licht einen weiteren Verlust von etwa 10% an IES-Aktivität (S. 32f.).

     
  6. 6.

    Bei Extraktion von IES aus Kieselgel, das mit IES-freiem Pflanzen-Diffusat oder-Extrakt versetzt war, kann nach anschließender Dünnschicht-Chromatographie des auf dem Wasserbad bei ca. 80°C eingeengten Extraktes mit einer Ausbeute von 85% gerechnet werden (S. 33f.).

     

Summary

  1. 1.

    TheAvena-silica gel-curvature test is a modification of theAvena-daylight test according toSöding. The auxin to be tested is transferred to the agar blocks in silica gel, which is scraped out of a distinct chromatogram zone after thin-layer chromatography and which is then spread over the ager blocks. For the controls, methanolic auxin solutions are given with a blood sugar pipette upon delimited fields of a thin layer of silica gel, which then are scraped out and transferred to the agar. The agar blocks together with the applied silica gel are used in the curvature test (p. 24).

     
  2. 2.

    IAA spreads equally over the agar after 1/2–1 hour's stay in a moist chamber, even when it was inequally distributed over the silica gel field before this was scraped out (p. 25f.).

     
  3. 3.

    For IAA concentrations between 8×10−8 and 4×10−7 in the agar blocks, i.e. 8–40 ng of original amount the best quantitative separation was attained with test times between 1,5 and 2,5 hours (p. 26f.).

     
  4. 4.

    After thin-layer chromatography, IAA can be transferred to agar blocks practically without loss (p. 30f.).

     
  5. 5.

    Using thin layers of silica gel HF254 theR f -zone of the substance to be tested can be identified, without spraying, under short wave UV light as a non-fluorescent spot. It is possible to detect quantities as low as 0,5μg IAA. A longer exposure of the chromatogram to short wave UV light should be avoided. After 5 min irradiation with short wave UV, a loss of about 10% of IAA activity appears; subsequent 5 min irradiation with long wave UV produces a further loss of 10% (p. 32f.).

     
  6. 6.

    The extraction of IAA from silica gel, which had previously been treated with a diffusate or an extract of IAA-free plant material gives a yield of about 85% when the extract, reduced in volume on a water bath, is chromatographed on a silica gel plate (p. 33f.).

     

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Copyright information

© Springer-Verlag 1964

Authors and Affiliations

  • Harald Kaldewey
    • 1
  • Egon Stahl
    • 2
  1. 1.Botanischen Institut der Universität des SaarlandesSaarbrücken
  2. 2.Institut für Pharmakognosie der Universität des SaarlandesSaarbrücken

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