Untersuchungen zu einer neueren elektrochemischen Bestimmung der Xanthindehydrogenase-Aktivität Zur generellen Anwendbarkeit der potentiometrischen Methode nach Graf SoLms

  • F. Kiermeier
  • H. -P. Wangnick
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Zusammenfassung

Graf zuSolms (1) wandte kürzlich das vonKovacs u. Mitarb. (2) für die Bernsteinsäure-dehydrogenase beschriebene Verfahren auf die Xanthindehydrogenase (XD) an. Da er seine Versuche hauptsächlich unter stets gleichbleibenden Bedingungen — insbesondere fast ausschließlich im Substratsättigungsbereich durchgeführte — hielten wir es für angebracht, diese für die XD relativ neue Methode unter variierten Bedingungen zu untersuchen. Wir konnten insbesondere zeigen, daß der potentiometrische Kurvenverlauf bei der Messung der Reaktion:
$$Xanthin\overset {XD} \leftrightarrows Harns\ddot aure$$
normalerweise in 6 wohldefinierte Phasen unterteilt werden kann. Einer dieser Teilbereiche ist als mehr oder weniger stark ausgeprägter Verzögerungsbereich (lag-phase) gekennzeichnet. Diese Phase der Gesamtreaktion könnte möglicherweise für den Abbau der Purin-Basen im intermediären Stoffwechsel bedeutsam sein. Ferner untersuchten wir die unterschiedlichen Einflüsse einiger Versuchsgrößen auf die einzelnen Phasen der Reaktionskurve. Hierbei mußten wir uns im vorliegenden Bericht auf eine Auswahl der wichtigsten Ergebnisse beschränken. Die Methode dürfte nunmehr uneingeschränkt zur Bestimmung der XD-Aktivität über den gesamten Bereich der Substratkonzentration einsetzbar sein, besonders auch bei veränderten Versuchsbedingungen. Sie dürfte gleichfalls generell auf die Bestimmung von Dehydrogenasen anzuwenden sein.

Analysis of a Newer electrochemical method for the determination of xanthindehydrogenase-activity

Summary

Recently Graf Somis (1) made available the potentiometric method ofKovács et al. (2) for the determination of the activity of xanthinedehydrogenase (XD); — EC: 1.2.3.2. — As he carried out his assays preferable under fixed conditions, especially in the range of substrate-saturation, we deemed it advisable to analyse the method for itself under varied conditions. Particularly we could show that the potentiometric curve in measuring the reaction:
$$xanthine\overset {XD} \leftrightarrows uricacid$$
normally can be subdivided into 6 well-defined phases. One of these is characterised as a more or less well-markedlag-phase. This part of the whole reaction perhaps could be of interest for the decomposition of purine-bases in the intermediary metabolism.

Moreover we tested the different effects of several experimental details on the single phases of the reaction-curve. In this paper we could only pick out some essential results of this part of the whole work, however. (Further information is given in the cited thesis.)

The method should now be available for the determination of xanthinedehydrogenase-activity nearly over the whole range of substrate-concentration and especially under varied conditions, too. It should also be possible to make use of it in determining the activities of dehydrogenases in general.

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Copyright information

© Springer-Verlag 1970

Authors and Affiliations

  • F. Kiermeier
    • 1
  • H. -P. Wangnick
    • 1
  1. 1.Mitteilung aus dem Milchwissenschaftlichen Institut der Technischen Hochschule München in WeihenstephanWeihenstephanGermany

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