Zur Konformation von Makroglobulinen beim Morbus Waldenström

Zusammenfassung

Durch viscosimetrische Untersuchungen wird die Zeitabhängigkeit der Merkaptoäthanol-Denaturation einesγM-Paraproteins bei verschiedenen pH-Werten bestimmt. Durch Verhinderung des Zutritts von Luftsauerstoff zur Reaktionslösung wird die Entstehung sekundärer Aggregationsprodukte vermieden. Die Bedeutung nicht-kovalenter Bindungen für die Makroglobulinstruktur wird durch die Ergebnisse bestätigt. In Übereinstimmung mit anderen Autoren wurde das pH-Optimum der Denaturation durch Sulfhydryl-Reagentien bei leicht alkalischem pH gefunden. Bei diesen pH-Werten werden zwischenkettige Disulfidbrücken gelöst, ein Vorgang, der an dem Auftreten freier L- und H-Ketten nachweisbar ist. In sauren Puffern mit Merkaptoäthanol sind dagegen keine den L- oder H-Ketten entsprechenden niedermolekularen Komponenten in der Ultrazentrifuge festzustellen. Da trotzdem eine Viscositätsabnahme um fast 50% des Ausgangswertes eintritt, wird diskutiert, ob unter diesen Bedingungen binnenkettige Schwefelbrücken gespalten werden.

Summary

The kinetics of the mercaptoethanoldenaturation of an isolatedγM-paraprotein was studied at various pH values. Aggregation of subunits by oxydation was prevented by nitrogen atmosphere. The importance of noncovalent bonds for the conformation of this macroglobulin was confirmed. The pH optimum of the denaturation by sulfhydryl reagents was found at pH 8.3. At this pH interchain disulfide bonds are disrupted. At low pH no 6 S component was observed in the sedimentation pattern in the presence of mercaptoethanol. The decrease of viscosity under these conditions is probably caused by splitting of intrachain disulfide bonds.