Klinische Wochenschrift

, Volume 60, Issue 9, pp 451–455 | Cite as

Immunocytochemical method for the detection of terminal deoxynucleotidyl transferase in acute leukemia

  • A. D. Ho
  • V. Helmstädter
  • W. Hunstein
Originalien

Summary

Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) has become an important marker for the classification of acute leukemias. Originally detected by a biochemical assay, the presence of this enzyme in leukemia can now be detected by making use of a highly specific antibody and by applying the immunofluorescence method. In this study, an attempt was made to apply the unlabeled peroxidase-antiperoxidase (PAP) technique for the examination of TdT positive cells. We have optimized this method and have compared the different assays — biochemical, immunofluorescence, and immunocytochemical (PAP) — in ten patients with acute leukemia. The results obtained from all three methods are in accordance with one another, but the PAP method is a further simplification for the detection of TdT in the routine diagnostic of acute leukemias.

Key words

Immunocytochemical method Peroxidase-antiperoxidase technique TdT 

Immunzytochemische Methode zum Nachweis von terminaler Desoxynucleotidyl-Transferase bei akuten Leukämien

Zusammenfassung

Das Enzym „terminale Desoxynucleotidyltransferase“ (TdT) stellt einen wichtigen Marker für die Klassifizierung der Leukämien dar. Ursprünglich wurde dieses Enzym durch einen biochemischen Assay bestimmt. Durch die Entwicklung eines spezifischen Anti-TdT Antikörpers kann das Enzym durch Immunfluoreszenz-Technik nachgewiesen werden. Wir haben diese Methode weiter entwikkelt und die Peroxidase-Antiperoxidase (PAP)-Technik angewandt und optimiert. Bei Patienten mit akuten Leukämien ergab unser Vergleich der Ergebnisse der Bestimmung mit 3 Methoden (biochemisch, immunfluoreszenzoptisch und immunzytochemisch) eine ausgezeichnete Korrelation. Die PAP-Technik bietet außerdem weitere Vorteile: Die Untersuchung auf TdT kann auf Blut- oder Knochenmarkausstrichen mit dem Lichtmikroskop erfolgen. Die Präparate können für Dokumentationszwecke aufbewahrt werden. Gegenfärbungen sind auf demselben Präparat möglich. Mithin eignet sich die PAP-Methode zum TdT-Nachweis für die Routine-Diagnostik der Leukämien.

Schlüsselwörter

Immunzytochemische Methode Peroxidase-Antiperoxidase Technik TdT 

Preview

Unable to display preview. Download preview PDF.

Unable to display preview. Download preview PDF.

References

  1. 1.
    Beutler E, Blume KG (1979) Terminal deoxynucleotidyl transferase, biochemical properties, cellular distribution and hematologic significance. Prog Hematol 11:17–68Google Scholar
  2. 2.
    Bollum FJ (1962) Oligodeoxyribonucleotide primed reactions catalysed by calf thymus polymerase. J Biol Chem 237:1945–1949Google Scholar
  3. 3.
    Bollum FJ (1975) Antibody to terminal deoxynucleotidyl transferase. Proc Natl Acad Sci USA 72:4119–4122Google Scholar
  4. 4.
    Bollum FJ (1979) Terminal deoxynucleotidyl transferase as a hematopoietic cell marker. Blood 54:1203–1215Google Scholar
  5. 5.
    Bradstock KF, Janossy G, Hoffbrand AV, Ganeshaguru K, Llewellin P, Prentice HG, Bollum FJ (1981) Immunofluorescent and biochemical studies of terminal deoxynucleotidyl transferase in treated acute leukemia. Br J Haematol 47:121–131Google Scholar
  6. 6.
    Gralnick HR, Galton DAG, Catovsky D, Sultan C, Bennett JM (1977) Classification of acute leukemia. Ann Intern Med 87:740–753Google Scholar
  7. 7.
    Hecht T, Forman SJ, Bross KJ, Schmidt GM, Blume K (1981) Immunoenzymatical staining for terminal deoxynucleotidyl transferase (Letter to the editor) N Engl J Med 304:848–849Google Scholar
  8. 8.
    Helmstaedter V, Taugner C, Feurle GE, Forssmann WG (1977) Localization of neurotensin-immunoreactive cells in the small intestine of man and various mammals. Histochemistry 53:35–41Google Scholar
  9. 9.
    Ho AD, Hunstein W, Uhl N, Storch H-H (1981) Bedeutung der terminalen Desoxynucleotidyl-transferase bei akuten Leukämien und bei malignen Lymphomen. Erfahrungen mit der Immunofluoreszenzmethode. Dtsch Med Wochenschr 106:643–647Google Scholar
  10. 10.
    Hoffbrand AV, Ganeshaguru K, Janossy G, Greaves MT, Catovsky D, Woodruff RK (1977) Terminal deoxynucleotidyl transferase levels and membrane phenotypes in diagnosis of acute leukemia. Lancet II:520–524Google Scholar
  11. 11.
    Jäger G (1981) A simple test for the terminal deoxynucleotidyl transferase using the peroxidase-antiperoxidase technique. Blut 42:259–261Google Scholar
  12. 12.
    Stass SA, Schumacher HR, Keneklis TP, Bollum FJ (1979) Terminal deoxynucleotidyl transferase immunofluorescence of bone marrow smears. Experience in 156 cases. Am J Clin Pathol 72:898–903Google Scholar
  13. 13.
    Sternberger LA (1979) The unlabelled antibody peroxidaseantiperoxidase (PAP) method. In: Sternberger LA (ed) Immunocytochemistry. Wiley, New York, pp 104–169Google Scholar

Copyright information

© Springer-Verlag 1982

Authors and Affiliations

  • A. D. Ho
    • 1
  • V. Helmstädter
    • 1
  • W. Hunstein
    • 1
  1. 1.Med. Univ.-PoliklinikHeidelbergFederal Republic of Germany

Personalised recommendations