Gewinnung von Granulozyten zur Transfusion mit dem IBM-Blutzellseparator von gesunden Spendern

Zusammenfassung

Durch Variation der mit dem IBM-Zellseparator zur Gewinnung von Leukozyten gebräuchlichen Methoden konnte gezeigt werden, daß die Antikoagulierung mit einer Kombination von Heparin und ACD, die Verwendung von Neoplasmagel^® sowie die Reduzierung des extrakorporalen Blutvolumens die besten Voraussetzungen zur Gewinnung von Granulozyten sind. So konnten von einem gesunden Spender in 6 h im Mittel (n=5) 1,6x10¹⁰ Granulozyten isoliert werden bei einem Reinheitsgrad von Granulozyten: Lymphozyten: Thrombozyten: Erythrozyten=1∶1,2∶11∶151. Die Ergebnisse konnten darüber hinaus durch Erhöhung der Granulozytenausgangszahl beim Spender mit Prednisolon gesteigert werden auf eine mittlere Ausbeute (n=5) von 5,6x10¹⁰ bei einem Reinheitsgrad von Granulozyten: Lymphozyten: Thrombozyten: Erythrozyten=1∶0,2∶3,2∶40. Die Viabilität der isolierten Granulozyten wurde geprüft durch Untersuchung ihres Verhaltens nach Markierung mit DF³²P und autologer Transfusion. Gegenüber nicht isolierten, im Vollblut markierten Granulozyten zeigte sich beiobne Prednisolon isolierten Granulozyten eine Verminderung, beimit Prednisolon isolierten Granulozyten eine Erhöhung der Transfusionseffektivität.

Summary

By varying the common methods for separating leukocytes with the IBM cell separator the anticoagulation with a combination of Heparin and ACD, the use of Neoplasmagel^® as well as the reduction of the extracorporal blood volume have shown to be the best conditions to separate granulocytes. From 5 healthy donors a mean yield of 1.6x10¹⁰ granulocytes could be obtained during six h with a degree of purity of granulocytes: lymphocytes: thrombocytes: erythrocytes=1∶1.2∶11∶151. These results could be improved by increasing the count of granulocytes in the donor's blood with prednisolone in another 5 donors to a mean yield of 5.6x10¹⁰ with a degree of purity of granulocytes: lymphocytes: thrombocytes: erythrocytes=1∶0.2∶3.2∶40. The viability of separated granulocytes was proved by investigating their circulation after labeling with³²P and autologous transfusion. Comparing with granulocytes which were not separated but labeled in fresh whole blood the effectivity of transfusion was diminished when separated granulocytes were transfused without stimulation with prednisolone and was increased when separated granulocytes were transfused after stimulation with prednisolone.