Summary
This study describes a sensitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using rabbit anti-bovine α S1-casein antibody for the detection of commercial milk and milk-containing vomit. The antibody does not react with other human body fluids such as breast milk. The stability of α S1-casein antigenic activity was examined after storage at different temperatures and enzyme digestion. There was no decrease after storage for one year at room temperature but 40% of the activity was lost after 6 months at 37°C. Enzyme digestion (6 hours, 37°C) resulted in 65 ∼ 70% loss of activity but the antibody reacted with the peptide fragments of α S1-casein. Vomit samples from 3 normal infants were tested by ELISA, and a S 1-casein could be detected in 1 cm2 stain.
Zusammenfassung
Die vorliegende Untersuchung beschreibt einen empfindlichen, enzymgebundenen Immunabsorptionstest (ELISA), der einen Anti-Rinder-α S 1-Casein-Antikörper vom Kaninchen benutzt für den Nachweis kommerziell erhältlicher Milch und milchhaltigen Erbrochenem. Der Antikörper reagiert nicht mit anderen menschlichen Körperflüssigkeiten wie Brustmilch. Die Stabilität der Antigen-Aktivität von α S1-Casein wurde nach Lagerung bei verschiedenen Temperaturen und enzymatischem Verdau untersucht. Es gab keinen Abfall nach einjähriger Lagerung bei Raumtemperatur, aber 40% der Aktivität war nach sechsmonatiger Lagerung bei 37°C verloren. Enzymatischer Verdacht (6 Stunden, 37°C) führte zu einem Aktivitätsverlust von etwa 65–70%, aber der Antikörper reagiert mit den Peptid-Fragmenten von a S1-Casein. Proben von Erbrochenem von drei normalen Kindern wurde mit Hilfe der ELISA-Technik getestet und α S1-Casein konnte in 1 cm2 großen Flecken nachgewiesen werden.
Similar content being viewed by others
References
Boulloche J, Mallet E, Basuyau JP, Tayot P, Samson-Dollfus D (1986) The value of serum IgE assay in milk aspiration and the sudden infant death syndrome. Acta Paediatr Scand 75:530–533
Creamer LK, Richardson T (1984) Anomalous behaviour of bovine α S1- and β-caseins on gel electrophoresis in sodium dodecyl sulfate buffers. Arch Biochem Biophys 234:476–486
Davies DT, Law AJR (1977) An improved method for the quantitative fractionation of casein mixtures using ion-exchange chromatography. J Dairy Res 44:213–221
Eigel WN, Butler JE, Ernstrom CA, Farrell HM, Harwalkar VR, Jenness R, Whitney R McL (1984) Nomenclature of proteins of cow's milk, J Dairy Sci 67:1599–1631
Lammli UK (1970) Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 227:680–685
Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall RJ (1951) Protein measurement with the Folin phenol reagent. J Biol Chem 193 265–275
Matukura T (1940) Die Anwendung der Milchkoagulationsreaktion zur Unterscheidung von Menschen- und Kuhmilch in der gerichtlichen Medizin (in Japanese, abstract in German) Acta Crim Japon 14:11–20
Mercier JC, Grosclaude F, Ribadeau-Dumas B (1971) Structure primarie de la caseine α S1-bovine. Fur J Biochem 23:41–46
Otani H, Takayama K, Tokita F (1985) Antigenic identity of bovine α S1- and α S1-1 caseins. Milchwissenschaft 40:24–26
Otani H, Takahashi F, Tokita F (1986a) Antigenic reactivities of fragments obtained by cyanogen bromide cleavage of bovine α S1-casein toward antiserum to intact α S1-casein. Agric Biol Chem 50:607–613
Otani H, Takayama K, Tokita F (1986b) Studies on the antigenicity of bovine α S1-casein: antigenic activities of some peptides derived from C-terminal region. Milchwissenschaft 41:565–568
Towbin H, Staehelin T, Gordon J (1979) Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications. Proc Natl Acad Sci USA 76:4350–4354
Watanabe S, Dinh TL, Ochiai Y, Hashimoto K (1983) Immunochemical specificity of myosin light chains from mackerel ordinary and dark muscles. J Biochem 94:1409–1419
Author information
Authors and Affiliations
Rights and permissions
About this article
Cite this article
Sato, I. Detection of α S1-casein in vomit from bottle-fed babies by enzyme-linked immunosorbent assay. Int J Leg Med 105, 127–131 (1992). https://doi.org/10.1007/BF01625163
Received:
Revised:
Issue Date:
DOI: https://doi.org/10.1007/BF01625163