Beitrag zur biologischen Bestimmung der Sedimentationskonstanten tierpathogener Viren in der „improvisierten“ Separationszelle

Zusammenfassung

Es wird über experimentelle Beiträge zur biologischen Bestimmung der Sedimentationskonstanten tierpathogener Viren mit Hilfe der „improvisierten Separationszelle“ berichtet. Unter „improvisierter Separationszelle“ ist eine sektorförmige Ultrazentrifugenzelle zu verstehen, deren Boden zur Trennung von überstand und Sediment mit einer doppelten Lage Filtrierpapier ausgelegt ist.

Sedimentationsversuche mit dem Enzephalomyokarditis-Virus der Maus und einem Stamm vom Typ II des Poliomyelitis-Virus ergaben, da\ die nach gestaffelten Zentrifugierzeiten gemessenen Aktivitätsabnahmen im überstand der Zelle zunächst der theoretischen Voraussage entsprechen. Bei längeren Versuchszeiten treten jedoch Abweichungen in dem Sinne auf, da\ stets gewisse „Restaktivitäten“ nachzuweisen sind.

Durch sukzessive Zentrifugation konnte gezeigt werden, da\ diese „Restaktivitäten“ nicht auf eine heterogene Grö\enverteilung des infektiösen Prinzips zurückzuführen sind. Als Ursache werden methodisch bedingte, im einzelnen jedoch nicht näher analysierte Faktoren angenommen.

Berücksichtigt man dieses Phänomen der „Restaktivitäten“ und au\erdem die Tatsache, da\ die Streuungen beim Messen der biologischen Aktivitäten einen um so grö\eren Einflu\ auf die mathematische Auswertung der Ergebnisse ausüben, je geringer die Aktivitätsabnahme ist, dann lassen sich die Sedimentationskonstanten von Viren aus der Konzentrationsabnahme im überstand der „improvisierten Separationszelle“ näherungsweise bestimmen.

Modellversuche ergaben für das EMC-Virus Sedimentationskonstanten zwischen 133 und 183 S (Mittelwert =152 S), für einen Lansing-Stamm des Poliomyelitisvirus solche zwischen 134 und 155 S (Mittelwert=143 S). Die Mittelwerte stimmen überraschend gut mit bereits vorliegenden Ergebnissen optischer Messungen überein.

In der abschlie\enden Diskussion wird festgestellt, da\ bei biologischen S₂₀-Bestimmungen mit der „improvisierten Separationszelle“ etwa gleich gute Ergebnisse wie mit der klassischen Separationszelle erzielt werden können.