Zusammenfassung
Die Wärmedenaturierung des ß-Lactoglobulins wurde in einer hierfür geeigneten Lichtstreuungsapparatur mit automatischer Registrierung kontinuierlich verfolgt.
Lösungen von 0,05, 0,1, 0,2 und 0,5% in Phosphatpuffer pH 7,0, Ionenstärke 0,1, wurden im Temperaturbereich von 69–93° C und bei 81° C im pH-Bereich 3,6–9,2 untersucht, ebenso wurde der Einfluß der Ionenstärke festgestellt.
Die Empfindlichkeit der Meßanordnung eröffnete die Möglichkeit zur Untersuchung von Lösungen geringer Konzentration, wodurch die Reaktionsgeschwindigkeit sehr herabgesetzt werden konnte. Auf diese Weise konnten im zeitlichen Ablauf der Reaktion 4 Perioden deutlich unterschieden werden, die bei schneller verlaufenden Denaturierungen in Lösungen höherer Konzentration ineinander übergehen und einen monotonen Reaktionsverlauf vortäuschen.
Die Änderung der Lichtstreuung wies darauf hin, daß in der 1. Periode Spaltungen des nativen Moleküls in 2 Bruchstücke, in den folgenden Perioden Aggregationen zu geradzahligen Vielfachen der Bruchstücke wahrscheinlich sind. Die Reaktionsordnung ist in den verschiedenen Perioden nicht gleich; in der 3. und 4. Periode ändert sie sich mit der Temperatur
Die Reaktionsgeschwindigkeiten der 3. und 4. Periode durchlaufen bei 87° ein Maximum; hieraus sich errechnende scheinbare Aktivierungsenergien fallen mit steigender Temperatur bis zu negativen Werten. Die scheinbare Aktivierungsenergie der 2. Periode ist kleiner als 30 kcal.
Meßdaten, die durch Abschrecken erhitzter Lösungen gewonnen werden, scheinen problematisch zu sein, da u. U. die Denaturierung durch Erschütterungen „ausgelöst“ wird.
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Stauff, J., Ühlein, E. Kinetik der Protein-Denaturierung. Kolloid-Zeitschrift 143, 1–21 (1955). https://doi.org/10.1007/BF01519936
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