Methode und Mechanismus des Nachweises von Methämoglobin in Erythrocyten eines Blutausstriches

Zusammenfassung

Es werden Methode, Bedingungen und Mechanismus der Differenzierung von Methämoglobin und Oxyhämoglobin in einzelnen Erythrocyten auf dem Objektträger beschrieben.

Das Prinzip der Methode beruht auf der Hemmung der peroxydatischen Aktivität von Methämoglobin nach Umwandlung des Blutfarbstoffs in Cyanhämiglobin. Methämoglobin wird in dieser Form durch eine bestimmt zusammengesetzte Lösung aus den Zellen herausgelöst, während Oxyhämoglobin in den Erythrocyten bleibt und durch Anfärben sichtbar gemacht werden kann.

Aus den Untersuchungen läßt sich folgern, daß Katalase und Hämoglobin als Peroxydase hinsichtlich der Schutzwirkung gegenüber der Peroxyddenaturierung von luftgetrocknetem Blutfarbstoff qualitativ unterschiedlich wirksam sind.

Summary

Previous methods of methemoglobin estimation produce information about methemoglobin content of total erythrocyte population. A new method for distinguishing methemoglobin from oxyhemoglobin in single red blood cells is presented; it allows to study the intracellular formation and reduction of methemoglobin under several conditions. The method is based on the inhibition of the peroxidative activity of methemoglobin by its conversion into cyanmethemoglobin.

In a solution containing citric acid, ethanol and hydrogen peroxide cyanmethemoglobin is eluted from red cells of air dried blood smears while oxyhemoglobin remains within the cell.

Mechanism and conditions for distinguishing the two hemoglobins are described. The investigation permits the conclusion that catalase and peroxidase have a different protective function on the peroxide denaturation of air dried hemoglobin.