Summary
Changes of activity and distribution in rat liver of the lysosomal enzymes cathepsin D, cathepsin A, and acid carboxypeptidase are described as a result of D-galactosamine action. Hepatitis was provoked by acute and by prolonged administration of D-galactosamine. A lysosomal pellet and a lysosomal supernatant fraction were prepared from rat liver by centrifugation according to de Duve. Total activity of the respective enzymes mentioned above was assayed in the liver homogenate. A loss of enzyme activities in the lysosomal pellet and an increase in the supernatant fraction was observed after 25 hours in acute hepatitis following D-galactosamine administration. Total activities of cathepsin D and acid carboxypeptidase per gram liver wet weight were significantly decreased. Administration of D-galactosamine over 8 days resulted in a significant increase of the three enzyme activities in the lysosomal supernatant fraction; as compared to the acute hepatitis, however, this increase was less marked. Total activities of cathepsin D and A per gram liver wet weight increased during prolonged D-galactosamine administration; this is interpreted as a result of liver regeneration.
D-Galactosamine action in liver leads to more labile lysosomes.
Zusammenfassung
In der vorliegenden Arbeit wird über das Verhalten der lysosomalen Enzyme Kathepsin D, Kathepsin A und saure Carboxypeptidase bei einer akut und einer subakut verlaufenden Galaktosamin-Hepatitis der Ratte berichtet. Es werden Rattenlebern nach der Methode von de Duve durch Zentrifugation in ein Lysosomen-Sediment und einen Lysosomen-Überstand fraktioniert. Ein Teil der Leber wird zur Bestimmung der Gesamtaktivität der oben genannten Enzyme homogenisiert. Bei der akuten Hepatitis nehmen nach 25 Std die Enzymaktivitäten in der Lysosomen-Sediment-Fraktion ab, in der Lysosomen-Überstands-Fraktion zu. Die Aktivität dieser Enzyme pro g Leberfrischgewicht nimmt bis auf die von Kathepsin A signifikant ab. Bei der subakuten Galaktosamin-Hepatitis ist nach 8 Tagen ein signifikanter Anstieg der 3 Enzymaktivitäten in der Lysosomen-Überstandsfraktion nachweisbar; er ist im Vergleich zur akuten Schädigung weniger ausgeprägt. Die Aktivitäten von Kathepsin D und A pro g Leberfrischgewicht nehmen zu; diese Zunahme im Verlauf der subakuten Hepatitis könnte Ausdruck einer Regenerationsleistung der Leber sein.
Unter der Wirkung von Galaktosamin werden die Lysosomen instabiler.
Similar content being viewed by others
Literatur
Reutter, W., Lesch, R., Keppler, D., Decker, K.: Galactosamin-Hepatitis. Naturwissenschaften55, 497 (1968).
Keppler, D., Lesch, R., Reutter, W., Decker, K.: Experimental hepatitis induced by D-galactosamine. Exp. molce. Path.9, 279 (1968).
Lesch, R., Reutter, W., Keppler, D., Decker, K.: Liver restitution after acute galactosamine hepatitis: Autoradiographic and biochemical studies in rats. Exp. molec. Path.12, 58 (1970).
Keppler, D., Decker, K.: Studies on the mechanism of galactosamine hepatitis. Europ. J. Biochem.10, 219 (1969).
—— Fröhlich, J., Reutter, W., Wieland, O., Decker, K.: Changes in uridine nucleotides during liver perfusion with D-galactosamine. FEBS Letters4, 278 (1969).
—— Rudigier, J. F. M., Bischoff, E., Decker, K. F. A.: The trapping of uridine phosphates by D-galactosamine, D-glucosamine, and 2-deoxy-D-galactose. Europ. J. Biochem.17, 246 (1970).
Lesch, R., Keppler, D., Reutter, W., Rudigier, J., Oehlert, W., Decker, K.: Entwicklung einer experimentellen Lebercirrhose durch D-Galactosamin. Virchows Arch. Abt. B Zellpath.6, 57 (1970).
Reutter, W., Keppler, D., Lesch, R., Decker, K.: Zum Glykoproteidstoffwechsel bei der Galactosamin-induzierten Hepatitis. Verh. dtsch. Ges. inn. Med.75, 365 (1969).
-- Lukaschek, R., Lesch, R., Decker, K.: On the synthesis and secretion of serum glycoproteins in the normal-and galactosamine hepatitic rat. Proc. 4th Meeting Europ. Study Group for Cell Proliferation, p. 43 (1970).
Medline, A., Schaffner, F., Popper, H.: Ultrastructural features in galactosamine-induced hepatitis. Exp. molec. Path.12, 201 (1970).
Duve, C. de, Wattiaux, R., Wibo, M.: Effects of fat soluble compounds on lysosomes in vitro. Biochem. Pharmacol.9, 97 (1962).
Stein, U., Platt, D., Heißmeyer, H.: Zur Frage der Induzierbarkeit lysosomer Enzyme der Rattenleber durch Phenobarbital. Arzneimittel-Forsch. (Drug Res.)20, 1770 (1970).
Anson, M. L.: The estimation of pepsin, trypsin, papain and cathepsin with hemoglobin. J. gen. Physiol.22, 79 (1938).
Matheson, A. T., Tattrie, B. L.: A modified Yemm and Cocking ninhydrin reagent for peptidase assay. Canad. J. Biochem.42, 95 (1964).
Buddecke, E., Reich, G., Stein, U.: Über die saure Carboxypeptidase in der Aorta des Rindes. Hoppe-Seylers Z. physiol. Chem.347, 192 (1966).
Stein, U., Weber, U., Buddecke, E.: Über eine neue Carboxypeptidase aus der Milz. Hoppe-Seylers Z. physiol. Chem.349, 472 (1968).
Ceriotti, G.: A microchemical determination of deoxyribonucleic acid. J. biol. Chem.198, 297 (1952).
Keck, K.: An ultramicro technique for the determination of deoxypentose nucleic acid. Arch. Biochem. Biophys.63, 446 (1956).
Allison, A. C.: Lysosomes and cancer. In: Lysosomes in biology and pathology, eds. Dingle, J. T. and Fell, H. B., vol. II, p. 178. Amsterdam: North-Holland Publishing Co. 1969.
Hers, H. G.: α-Glucosidase deficiency in generalized glycogen-storage disease (Pompe's disease). Biochem. J.86, 11 (1963).
Pagliaro, L., Giglio, F., Le Moli, S., Catania, A., Citarella, P.:β-Glucuronidase and acid phosphatase activities of lysosomal preparations from human liver tissue obtained by needle biopsy from subjects with acute hepatitis and cirrhosis. J. Lab. clin. Med.63, 977 (1964).
Coltorti, M., Di Simone, A., Budillon, G., Barbieri, A. M., Del Vecchio-Blanco, C.: Aspetti metabolici nella evoluzione della lesione epatocellulare da MHV-3. Epatologia12, 425 (1966).
Kattermann, R., Wolfrum, D. I.: Cholesterinstoffwechsel und Lecithin-Cholesterin-Acyl-Transferase im Plasma bei experimenteller Hepatitis und Cholestase an der Ratte. Z. klin. Chem.8, 413 (1970).
Stein, U., Platt, D.: Nachweis und Verteilungsmuster der sauren Carboxypeptidase in menschlichen Geweben und ihre Beziehung zur Kathepsin-Aktivität. Klin. Wschr.46, 1145 (1968).
Author information
Authors and Affiliations
Additional information
Mit Unterstützung durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft.
Die Ergebnisse wurden zum großen Teil im Rahmen der Inaugural-Dissertation von Gunther Wangemann gewonnen.
Rights and permissions
About this article
Cite this article
Stein, U., Heissmeyer, H., Wangemann, G. et al. Aktivitätsverhalten lysosomaler proteinabbauender Enzyme der Rattenleber bei der Galaktosamin-Hepatitis: Kathepsin D, Kathepsin A und saure Carboxypeptidase. Klin Wochenschr 49, 550–554 (1971). https://doi.org/10.1007/BF01487993
Issue Date:
DOI: https://doi.org/10.1007/BF01487993