Altersabhängige biochemische Untersuchungen zur Frage der extrarenalen Wirkung von Furosemid

Summary

The present study investigated the activities of lysosomal enzymes of the liver after administration of Furosemid. 10 weeks and 1-year old male albino rats were treated with 40 mg Furosemid for 4 subsequent days. According to the method devised by de Duve a sediment rich in lysosomes was produced by fractionated centrifugation and subsequently the enzyme activity of β-glucuronidase, β-acetylglucosaminidase, cathepsin D and a collagenolytic enzyme was measured in the sediment as well as in the corresponding lysosomal supernatant. The protein content served as a reference for the enzyme activities. In addition, we investigated the activities of cytoplasmic enzymes such as GOT, GPT, gamma-GT and the alkaline phosphatase. The enzyme activity changes were age-dependent. With Furosemid treatment the activities of β-glucuronidase and cathepsin D increased in the lysosomal supernatant and the lysosomal sediment of the 1-year old rats, whereas the activities of the collagenolytic enzyme increased in the lysosomal sediment of the same group. In the lysosomal sediment of the 10-weeks old rats a decrease of β-glucuronidase, β-acetylglucosaminidase and cathepsin D was observed.

These results are discussed in the light of reports from the literature.

Zusammenfassung

In der vorliegenden Arbeit sollte der Einfluß von Furosemid auf das Aktivitätsverhalten lysosomaler Enzyme der Leber untersucht werden. 10 Wochen und 1 Jahr alte männliche Albinoratten wurden an 4 aufeinanderfolgenden Tagen mit jeweils 40 mg Furosemid behandelt. In Anlehnung an die Methode von de Duve wurde durch fraktionierte Zentrifugation eine Lysosomenfraktion und ein entsprechender Überstand gewonnen, in dem die Aktivitäten der lysosomalen Enzyme β-Glucuronidase, β-Acetylglucosaminidase, Kathepsin D und eines „kollagenolytischen“ Enzyms bestimmt wurden. Der Proteingehalt diente als Bezugsgröße der Enzymaktivitäten. Außerdem wurden im Serum die cytoplasmatischen Enzyme GOT, GPT, Gamma-GT und alkalische Phosphatase bestimmt. Die Enzymaktivitäten zeigten ein vom Alter der Tiere abhängiges Verhalten. Bei den 1 Jahr alten Tieren kam es unter Furosemidgaben zu einer Aktivitätszunahme der β-Glucuronidase und von Kathepsin D. im Lysosomensedimentüberstand und im Lysosomensediment, ebenso des „kollagenolytischen“ Enzyms im Lysosomensediment. Bei den 10 Wochen alten Tieren wurde — bei konstantem Proteingehalt — eine Aktivitätsabnahme der β-Glucuronidase, der β-Acetylglucosaminidase und von Kathepsin D im Lysosomensediment ermittelt.

Die Ergebnisse wurden denen in der Literatur bekannten Daten gegenübergestellt und diskutiert.