Zur Frage der Existenz löslicher und virusgebundener Anteile von komplementbindendem Antigen und Hämagglutinin des Vaccinevirus

Zusammenfassung

Vaccinevirus aus Kaninchenhaut zeigte bei wiederholtem Zentrifugieren bei 6000 g und Wiederaufnehmen des Sedimentes in den Überständen abnehmende Titer in Hämagglutination (HA) und Komplementbindung (KBR), in den Sedimenten abnehmende Titer in HA, aber konstante Titer in KBR. Die Aktivitäten der Überstände werden auf lösliches (S-) Antigen bzw. lösliches Hämagglutinin zurückgeführt, die während der Aufarbeitung und beim Stehenlassen von den Viruspartikeln oder von begleitenden Substanzen freigesetzt werden. Es gibt ein virusgebundenes komplement-bindendes Antigen (V-Antigen), aber wahrscheinlich kein virusgebundenes Hämagglutinin. Viruspartikel lassen sich durch wiederholtes Zentrifugieren nicht völlig von S-Antigen freiwaschen. Material aus infizierten HeLa-Zellen verhielt sich beim Zentrifugieren ähnlich. Komplement-bindende Antigène von Kaninchenhaut und HeLa-Zellen lassen sich ohne Aktivitätsverlust eingefroren bzw. bei Kühlschranktemperatur über Monate lagern. Für praktische Zwecke eignen sich S- und V-Antigene aus Kaninchenhaut am besten. Chorioallantois-Antigene können mit Kaninchenseren starke unspezifische Reaktionen zeigen.

Die vorliegenden Untersuchungen wurden von Seiten der Deutschen Forschungsgemeinschaft durch eine Beihilfe an Herrn Dr.D. Peters wesentlich gefördert. Wir danken FräuleinU. Lehmann, E. Roosen- Runge undA. Stromeyer für ihre experimentelle Mitarbeit.

Summary

When vaccinia virus from rabbit skin was centrifuged repeatedly at 6000 g. and the sediment was resuspended, the supernatants showed decreasing hemagglutination (HA) and complement fixation (CF) titers, the sediments decreasing HA titers, but constant CF titers. The activities of the supernatants are due to soluble (S) antigen or soluble hemagglutinin respectively, which are released from the virus particles or from accompanying substances during the centrifugation procedure and on storage. While these exists a virus-associated CF antigen (V antigen), there is probably no virus-associated hemagglutinin. Virus particles cannot be completely washed free from S antigen by repeated centrifugation. Material from infected HeLa cells showed a similar behaviour on centrifugation. CF antigens from rabbit skin and HeLa cells can be stored frozen or at refrigerator temperature for months without loss of activity. For practical purposes S and V antigens from rabbit skin appear to be most suitable. Antigens from chorioallantoic membranes can exhibit strong non-specific reactions with rabbit sera.