Radioimmunologische Bestimmung von 25-Hydroxycholecalciferol

Zusammenfassung

Der gegen Vitamin D₃ als Hapten gerichtete Antikörper bewährte sich bei der Bestimmung von 25-OH-Cholecalciferol (25-OH-CC). Der Versuch, auch Vitamin D₃ mit Hilfe dieses radioimmunologischen Verfahrens direkt zu bestimmen, scheiterte an der schlechten Löslichkeit des Vitamins in wäßrigen Systemen. Auf Grund der Kopplung an das C-Atom-3 wären der D-Ring und die C-17-Seitenkette als immundeterminante Stellen zu erwarten. Die Tatsache, daß der Antikörper zur Bestimmung des 25-OH-CC herangezogen werden kann, gleichzeitig aber keine Kreuzreaktion mit Cholesterin ergibt, weist auf die Bedeutung des offenen B-Ringes dieser Vitamine hin. Die Überprüfung der Methode ergab gute Reproduzierbarkeit und Genauigkeit. Der günstigste Auswertebereich liegt bei 0,1–2 ng/250μl Ansatz. Das beschriebene Verfahren ermöglicht die Bestimmung von 25-Hydroxy-Vitamin-D₃ ohne vorherige Reinigung des Probenextraktes.

Summary

The antibody to vitamin D₃ as hapten proved useful in determination of 25-hydroxycalciferol (25-OH-CC). The attempt also to determine vitamin D₃ directly with the aid of this radioimmunological procedure failed because of the poor solubility of the vitamin in aqueous systems. Because of the linkage to the C3 the D-ring and C17 side chain would be expected to be the immunodeterminant sites. Although the antibody can be used to determine 25-OH-CC, there is no cross-reaction with cholesterol. This indicates the importance of the open B-ring of this vitamin. Scrutiny of the method showed good reproducibility and accuracy. The most favorable evaluation region is 0.1–2 ng/250μl sample. The procedure described enables 25hydroxy vitamin D₃ to be determined without previous purification of the sample extract.