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Konzentrierung und Reinigung von Maul-und-Klauenseuche-(MKS-) Virus durch Polyäthylenglykol (PEG)

Concentration and purification of foot-and-mouth disease (FMD) virus by polyethylenglycol (PEG)

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Zusammenfassung

MKS-Virus der Typen 0, A und C wurde durch Präzipitation mit 8–10% (w/v) Polyäthylenglycol 6000 sowie nachfolgende Polster- und Zonenzentrifugierung im Saccharosegradienten aus infizierten BHK-Zellkulturen konzentriert und gereinigt. Die durchschnittliche Virusausbeute schwankte zwischen 0,7 und 8 mg/1000 ml infektiösem Kulturmedium, entsprechend 20–37% der Gesamtinfektiosität. In der quantitativen Polyacrylamidgel-Elektrophorese wurde in hochgereinigten Virussuspensionen eine schnell wandernde Proteinkomponente nachgewiesen, die mit markierter Virusnukleinsäure assoziiert war.

Summary

Foot-and-mouth disease virus, strains O1-Kaufbeuren, A2-Spain and C-Oberbayern, respectively, was purified from infected BHK-21 cell cultures by precipitation with polyethylenglycol 6000 to 8 and 10 per cent (w/v) concentration followed by centrifugation through a sucrose cushion and rate zonal centrifugation, Mean virus recovery was 0,7 to 8 rag per 1000 ml of infectious tissue culture fluid representing 20 to 37 per cent of total infectivity. Using highly purified virus suspensions a fast migrating protein component was detected by quantitative polyacrylamide gel electrophoresis which was associated with labelled viral nucleic acid.

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Literatur

  • Arlinghaus, R. B., J. Polatnick, andG. F. Vande Woude: Studies on foot-and-mouth disease virus ribonucleic acid synthesis. Virology30, 541–550 (1966).

    Google Scholar 

  • Bachrach, H. L., J. J. Callis, W. E. Hess, andR. E. Patty: A plaque assay for foot-and-mouth disease virus and kinetics of virus reproduction. Virology4, 224–236 (1957).

    Google Scholar 

  • Bachrach, H. L., andJ. Polatnick: Decigram quantities of pure foot-and-mouth disease virus from cell cultures. Bio-med. Engng.10, 589–599 (1968).

    Google Scholar 

  • Brown, F., andB. Cartwright: Purification of radioactive foot-and-mouth disease virus. Nature (Lond.)199, 1168–1170 (1963).

    Google Scholar 

  • Cowan, K. M., andJ. H. Graves: A third antigenic component associated with foot-and-mouth disease infection. Virology30, 528–540 (1966).

    Google Scholar 

  • Davis, B. J.: Disc Electrophoresis. Distillation Products Industries, Rochester, N.Y. (1963).

  • Dietzschold, B., O. R.Kaaden, T.Tokui, and H. O.Böhm: Polynucleotide sequence homologies among the RNA of foot-and-mouth disease virus type A, C and O. J. gen. Virol. (in press).

  • Fayet, M. T.: Concentration du virus de la fièvre aphteuse par le polye, thylene glycol. Ann. Inst. Pasteur118, 356–366 (1970).

    Google Scholar 

  • Hantschel, H., H. Hahnefeld undE. Hahnefeld: Eine einfache Methode zur Anreicherung von Virus aus Gewebekulturflüssigkeit durch Adsorption an Kalziumphosphat. Arch. exp. Vet.-Med.20, 751–766 (1966).

    Google Scholar 

  • Lowry, O. M., N. J. Rosebrough, A. L. Farr, andR. J. Randall: Protein measurements with the folin phenol reagent. J. biol. Chem.193, 265–275 (1951).

    Google Scholar 

  • Matthaeus, W.: Studien über Fällung, Ionenaustauscherchromatografie und elektrophoretische Beweglichkeit von Kulturviren in Gegenwart wasserlöslicher, linearer Polykondensations- und Polymerisationsprodukte. Zbl. Bakt. I. Abt. Orig.210, 1–14 (1969).

    Google Scholar 

  • Rowland, D. J., B. Cartwright, andF. Brown: Evidence for an Internal Antigen in Foot-and Mouth Disease Virus. J. gen. Virol.4, 479–487 (1969).

    Google Scholar 

  • Schwöbel, W., undV. Siedentopf: Charakterisierung eines drei Jahre alten Zellstammes aus der Schweineniere und Untersuchungen über sein Verhalten gegenüber dem Virus der Maul- und Klauenseuche. Zbl. Bakt. I. Abt. Orig.181, 3–16 (1961).

    Google Scholar 

  • Stoker, M., andJ. MacPherson: Studies on transformation of hamster cells by polyoma virusin vitro. Virology14, 359–370 (1961).

    Google Scholar 

  • Strohmaier, K.: Virusconcentration by ultrafiltration. In: Methods of Virology vol. 2 (K. Maramorosch andH. Koprowski, eds.), New York: Academic Press, 1967.

    Google Scholar 

  • Wagner, G. G., J. L. Card, andK. M. Cowan: Immunochemical studies of foot-and-mouth disease. VII. Characterization of foot-and-mouth disease virus concentrated by polyethylene glycol precipitation. Arch. ges. Virusforsch.30, 343–352 (1970).

    Google Scholar 

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Kaaden, O.R., Dietzschold, B., Matheka, H.D. et al. Konzentrierung und Reinigung von Maul-und-Klauenseuche-(MKS-) Virus durch Polyäthylenglykol (PEG). Archiv f Virusforschung 35, 104–113 (1971). https://doi.org/10.1007/BF01249757

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