Die Bestimmung der Wanderungsgeschwindigkeit tierischer Virusarten im Dichtegradienten der trägerfreien Zonenelektrophorese

Zusammenfassung

Eine Methode zur Bestimmung der Wanderungsgeschwindigkeit (Beweglichkeitskonstanten u) von optisch nicht erfaßbaren Substanzen, wie Viren oder anderen aktiven Stoffen, in der trägerfreien Zonenelektrophorese in einem Glukose-Dichtegradienten wird beschrieben. Gegenüber den bisher gebräuchlichen Verfahren erfolgt das Fraktionieren während der Elektrophorese. Gemessen wird die Wanderungszeit (Medianzeit 50%) der Substanz über eine konstante Wegstrecke. Der Glukose-Dichtegradient gewährleistet aufgrund der Konstanz des Produktes: Leitfähigkeit · Viskosität die gleichbleibende Wanderungsgeschwindigkeit über die gesamte Weglänge.

Ausführlich wird auf die Theorie der trägerfreien Zonenelektrophorese in einem Dichtegradienten eingegangen und dabei eine neue, formunabhängige Stoffkonstante e/A oder formabhängige e/r (e = Ladung und A = Formfaktor eines wandernden Teilchens — bei sphärischen Teilchen = dem Radius r) als zusätzliche charakteristische Konstante zur Diskussion gestellt. Am Beispiel eines Elektrophoreseversuches mit reinem Rinderalbumin werden die theoretischen Betrachtungen bestätigt.

Summary

A method is described using the carrierfree zone electrophoresis with a density gradient of glucose. This technique is useful for the determination of the migration velocity (electrophoretic mobility u) of substances as viruses or other active materials non-detectable by optical systems. Contrary to the methods used so far the fractionation takes place during electrophoresis. The migration time (median time 50%) of the substance is measured over a constant distance. The density gradient of glucose guaranteed the uniform migration velocity over the whole path because of the constant of the product: conductivity · viscosity.

The theory of the carrierfree zone electrophoresis with a density gradient is discussed in detail. Also a new substance constant independent e/A or dependent e/r on its form (e = charge and A = formfactor of a migratory particle — in case of spherical particles = radius r) is discussed as an additional characteristics constant. Using pure albumin of cattle as an example of an electrophoresis the theoretical considerations are confirmed.